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技术文章
皮肤组织蛋白提取试剂盒-2022已更新
点击次数：3332 发布时间：2022/8/15 8:11:14
皮肤组织蛋白提取试剂盒
一、产品简介：
皮肤组织蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种动物皮肤组织样品中提取蛋白。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。
本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保障。
本试剂盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白质电泳等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为不具有天然蛋白构象的非活性蛋白。
本试剂盒中不含有 EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本
二、产品特点：
1.提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4.总蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含
6.种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
皮肤组织蛋白提取试剂盒
三、产品组成：
| 名称规格 | 50T | 100T |
| 蛋白提取液 A | 25 ml | 50 ml |
| 蛋白酶抑制剂混合物 B | 100 ul | 200 μl |
| 注意：蛋白酶抑制剂未开盖使用也可以 2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。 | ||
四、自备材料：
1、离心机，振荡器，匀浆机/匀浆器，涡旋混匀器，移液器，冰箱
2、PBS缓冲液 ，蛋白定量试剂盒
3、离心管，吸头，一次性手套
五、操作步骤(仅供参考)：
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。5. 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
6.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1)提取液准备：每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物B和2ul蛋白酶抑制剂混合物C，混匀后置冰上备用。
2）取100-200mg皮肤组织样本，用PBS洗干净，然后用手术剪刀尽可能剪碎，加入500ul蛋白提取液，用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见固体。
3）将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在4℃条件下振荡30-40分钟。
4）在4℃，10000-14000×g 条件下离心15分钟。
5）将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到皮肤组织蛋白。
6）将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
皮肤组织蛋白提取试剂盒
六、注意事项：
1.蛋白浓度低？
处理部分组织样本时可能没有裂解，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。皮肤组织蛋白质含量较低，适当加大组织上样量。
2.用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用 Bradford 法定量。
3、正式实验请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得实验效果。
4、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底， 避免开盖时试剂损失。
5、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
6、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
7、使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用清洗并除残留清洁剂。
8、实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
七、有效期：2-8 ℃避光有效期为一年
皮肤组织蛋白提取试剂盒
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
