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技术文章

如何选择心仪的胰酶

点击次数:4928 发布时间:2022/7/18 8:59:20

简介

Trypsin: 胰酶,用于贴壁细胞或者组织传代的消化。一般有0.25%(四款)和0.05%(两款)两种浓度,含EDTA(四款)和不含EDTA(两款),含酚红(三款)和不含酚红(三款)。

动物细胞表面很多和培养皿结合的蛋白都是带有钙或者离子的蛋白,而胰酶能够降解这种带有钙或者离子的蛋白,因此它可以将细胞膜上和培养皿壁结合的蛋白降解,从而使细胞的培养皿壁脱离。(胰酶中常含的EDTA能够螯合这些钙镁离子,从而促进消化。

如何选择心仪的胰酶?

1.胰酶-EDTA消化液(0.25%胰酶)因含有EDTA,消化能力明显强于胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)。

2. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的胰酶-EDTA消化液(0.25%胰酶)和胰酶细胞消化液 (0.25%胰酶, 不含EDTA)。

3. 对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含EDTA的胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和胰酶细胞消化液(0.25%胰酶, 含酚红,不含EDTA)。

4. 对于胰酶特别敏感的细胞,即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况,推荐选择胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。

应用场景1:

应用场景2:

温馨提示:

培养细胞很重要的一点就是不能在细胞长的全融合后再消化传代(细胞在融合80-90%),这样细胞状态会很差,甚至死亡,表现再消化上就是,本来比较容易消化的细胞变的贴壁很紧,即使提高胰酶浓度和温度也很困难,所以应该尽量避免全融合的时候就进行处理。

0.25%的胰酶,不含EDTA,可以直接终止消化,吹下细胞,传代。含EDTA,则需离心丢弃含EDTA胰酶 ps:加胰酶需PBS、D-hanks液等冲洗1-2次,以利于胰酶消化。


【注意事项】

1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;

2.本产品需注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;

3.不宜 4℃期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

原创作者:上海雅吉生物科技有限公司

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