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技术文章
CCL1ELISA检测试剂盒分析说明书-测定
点击次数：2752 发布时间：2021/7/7 20:15:22
CCL1ELISA检测试剂盒分析说明书-测定
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：6瓶。
3. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
4. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
6. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
7. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
8. 终止液（S Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素，经过洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
标本的采集及保存
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 样本处理：血清或血浆标本推荐稀释10,000倍。
CCL1ELISA检测试剂盒分析说明书-测定
ELISA试剂盒操作注意事项：
ELISA试剂盒操作注意事项：
1）试剂应按标签说明书储存，使用恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
原创作者：上海仁捷生物科技有限公司
