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技术文章
人游离甲状腺素ELISA检测试剂盒-实验科研
点击次数：2858 发布时间：2021/5/26 9:42:10
人游离甲状腺素ELISA检测试剂盒-实验科研
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
【试剂配制】
1、 标准品
(1) 从试剂盒中取出一支标准品，于6000-10000rpm 离心30 。用1ml 样本稀释液溶解，并
用吸头对准冻存管底部反复吸打5 次以助溶解，充分混匀得到标准品S7，放置备用。
(2) 取7 个1.5 ml 离心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl 样本稀释液。吸取250μl 标准品
S7 到*个离心管中(S6)，轻轻吹打混匀。从S6 中吸取250μl 到第二个EP 管中(S5)，
轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0 为样本稀释液。
2、 洗液工作液
浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水，倒入烧杯或其
他洁净容器中，再量取10ml浓洗涤液，均匀加入，搅拌混匀，在临用配妥。浓洗涤液低温保
存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3、 生物素标记抗体工作液
生物素标记抗体液按1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生物素标记抗体加
990μl生物素标记抗体稀释液，轻轻混匀，在临用10分钟内配妥。
4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液
辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如
10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，轻轻混匀，在临用
10分钟内配妥。
原创作者：上海仁捷生物科技有限公司
