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发布时间:2021/5/10 22:01:14关注度:2957
测定原理:
PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+没有;通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算PDC活性。
需要的仪器,耗材:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
测定意义:
PDC主要存在于酵母中,是乙醇发酵的关键酶之,催化丙酮酸脱羧生成乙醛。测定原理:PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+没有;通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算PDC活性。需要的仪器,耗材:研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
样本处理
1、细胞或细菌样本的制备: 先收集细胞或细菌样本到离心管内,弃上清,按照每 500 万细胞或细菌加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或 细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次)。10000rpm,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2、组织样本: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨。16000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样本:直接检测。
原创作者:上海仁捷生物科技有限公司
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