单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
发布时间：2021/3/8 19:02:32关注度：2920
生化检测可以检测的样本类型的：
体液：血清(浆)、尿液、唾液等
组织：动植物组织
食品：果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等
其它：保健品、化妆品
产品说明：MDHAR催化MDHA还原生成AsA，在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。 MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsA和NAD+，NADH在340nm有特征吸收峰，但是NAD+没有。通过测定 340 nm光吸收下降速率，来计算出MDHAR活性。 注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 需自备的仪器和用品： 研钵/匀浆器、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。MDHAR 活性计算1、 按蛋白浓度计算 MDHAR活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1μmol NADH为个酶活单位。 MDHAR (U/mg prot) =[(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ε×d)×V反总×10 6]÷(Cpr×V样)÷T =0.268×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷Cpr2、 按样本质量计算 MDHAR活性单位定义：25℃中每克样本每分钟氧化1μmol NADH为个酶活单位。 MDHAR (U/g 质量) =[(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ε×d)×V反总×10 6]÷(V样÷V样总×W)÷T =0.268×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷W3、 按细胞数量计算 MDHAR活性单位定义：25℃中每10 4个细胞每分钟氧化1μmol NADH为个酶活单位。 MDHAR (U/10 4 cell) =[ (ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ε×d)×V反总×10 6]÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T =0.268×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷细胞数量 ε：NADH摩尔消光系数，6220 L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；10 6：单位换算系数，1mol=1×10 6μmol；V 反总：反应体系总体积，1mL=0.001L；V样：加入反应体系中上清液体积，300μL=0.3mL；V样总：提取液体积， 1mL；Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL，蛋白质浓度需要另外测定；W：样本质量，g；细胞数量：以10 4为单位计 量，万个；T：反应时间，2min。
原创作者：上海仁捷生物科技有限公司
第9年
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