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第9年
当前位置：阿仪网 > 上海仁捷生物科技有限公司 > 技术文献 > ELISA实验操作要点：ELISA实验总是遇到这些问题，怎么办呀？
发布时间：2025/2/6 10:54:56关注度：2685
高背景信号：
| 可能原因 | 解决方法 |
| 洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保洗涤充分 |
| 确保在洗涤前弃掉了所有残留抗体溶液 | |
| 样品或标准品中含干扰物 | 设置空白对照 |
| 缓冲液受污染 | 重新配制缓冲液 |
| 可能原因 | 解决方法 |
| 试剂添加顺序错误或试剂配制有误 | 重复实验 |
| 检查试剂配制方法 | |
| 复核试验试剂添加流程 | |
| HRP被叠氮化合物污染 | 使用新鲜配制的试剂 |
| 抗体用量不足 | 使用推荐的抗体量 |
整板呈规则蓝色：
| 可能原因 | 解决方法 |
| 洗板不充分或跳过洗板步骤未去除残留的非结合过氧化物酶 | 严格按照说明书洗涤流程操作 |
| 封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染 | 每步均需使用新的封板膜或试剂储液槽 |
| 缓冲液有金属或HRP污染 | 配制新鲜缓冲液 |
标准曲线不规佳梯度不明显：
| 可能原因 | 解决方法 |
| 实验操作流程有误 | 严格按照说明书操作流程 |
| 标准曲线稀释计算错误 | 重新计算制作新的标准曲线 |
板内重复性差：
| 可能原因 | 解决方法 |
| 洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保洗涤充分 |
| 重复使用封板胶纸 | 每步均需更换使用新的封板胶纸 |
| 未使用封板胶纸 | 需使用封板胶纸 |
板件重复性差：
| 可能原因 | 解决方法 |
| 洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保洗涤充分 |
| 确保已在洗涤前弃掉所有残留溶液 | |
| 孵育温度发生变化 | 严格按照推荐的温度孵育 |
| 勿在环境温度变化大的地方孵育 | |
| 操作流程改变 | 严格按照相同的操作流程 |
| 封板胶纸重复使用导致HRP残留污染 | 每一步均使用新的封板胶纸 |
原创作者：上海仁捷生物科技有限公司
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