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乙醇脱氢酶(ADH)测试盒实验科研

发布时间:2021/5/10 21:57:07关注度:2950

乙醇脱氢酶(ADH)测试盒实验科研
测定意义:ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。

测定原理:ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm处有吸收峰,而NAD+没有;测定340nm 吸光度下降速率,来计算ADH活性。

需要的仪器,耗材:研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。


注意:实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

乙醇脱氢酶(ADH)测试盒实验科研
样本处理

1、 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取 液)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。

2、 细菌、细胞:按照细胞数量(10 4个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 ,间隔 7 ,总时间 3min);16000g,4℃离心 20min, 取上清液置冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

原创作者:上海仁捷生物科技有限公司




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