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双缩脲法蛋白含量测试盒实验科研

发布时间:2021/4/8 19:51:47关注度:2977

测定意义:样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
自备仪器和用品: 可见分光光度计、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。

注意:实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

样本处理
1、液体样本:澄清无色液体样本可以直接测定。

2、组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提 取液)冰浴匀浆,10000rpm,4℃离心 10min,取上清,即待测液。(动物样本常常需要稀释)

3、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 ,间隔 7 ,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min, 取上清置于冰上待测。

原创作者:上海仁捷生物科技有限公司




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