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人B-淋巴细胞趋化因子12(CXCL12)ELISA试剂盒*上海新闻48T/96T
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详细内容
人B-淋巴细胞趋化因子12(CXCL12)elisa试剂盒*上海新闻中内容(96孔)
1. 重组人VEGF冻干标准品,10ng/管,总2管。
2. 预包被抗人VEGF抗体的96孔板。
3. 样品稀释液,30ml。
4. 生物素标记抗人VEGF,120μl,效价1:100。
5. 抗体稀释液,12ml。
6. 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC),120μl,效价1:100。
7. ABC稀释液,12ml。
8. TMB显色液,10ml。
9. TMB终止液,10ml。
需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪。
2. 自动洗板机。
3. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
4. 干净的试管和Eppendof管。
5. 使用中性PBS或TBS作为洗涤液。0.01M TBS配法为:1000ml H2O中加Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 纯乙酸450μl或浓盐酸700μl左右调节pH值(7.2⁻⁷.6)。 0.01 M PBS(pH7.2⁻⁷.6)配法:1000ml蒸馏水中加氯化钠8.5g, Na2HPO4·12H2O 3.5g, NaH2PO4·2H2O 0.25g。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
人B-淋巴细胞趋化因子12(CXCL12)ELISA试剂盒*上海新闻操作程序
所有试剂用前需在室温平衡。试剂或样品稀释时,切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。如果估计样品VEGF浓度>2000pg/ml时,应在试管中将样品用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目,并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9;做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。
2. 将1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg/ml的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为零孔。对于人血清、体液、组织匀浆或细胞培养上清,每孔先加50μι样品稀释液,再加50μι样品。
3. 酶标板加上盖,37℃反应120分钟。
4. 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体(将自动洗板机的洗涤次数设为零再开始即可);或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。不洗。
5. 将准备好的生物素抗人VEGF抗体工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白显色孔除外)。37℃反应60分钟。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。吸去或甩去多余液体。
7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白显色孔除外)。37℃反应30分钟。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。吸去或甩去多余液体。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB显色液,37℃避光反应20-25分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显)。
10. 按每孔0.1ml依次加入TMB终止液,此时蓝色立转黄色。
11. 用酶标仪在450nm测定O.D.值,将TMB空白显色孔设为对照。
12. 所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后,在坐标纸上画出曲线,以吸光值作为纵坐标,以浓度作为横坐标。
13. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算(下载)。应记住由于样品稀释了1倍,其实际浓度应该×2。
人B-淋巴细胞趋化因子12(CXCL12)ELISA试剂盒*上海新闻操作程序总结:
1. 加样品和标准品,37℃反应120分钟。不洗。
2. 加生物素标记抗体,37℃反应60分钟。0.01M TBS洗涤3次。
3. 加ABC,37℃反应30分钟。0.01M TBS洗涤5次。
4. TMB37℃反应20-25分钟。
5. 加入TMB终止液,读数。
| 虎组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1081P | 200ml/KIT |
| 熊猫组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1113P | 200ml/KIT |
| 大鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1083Z | 200ml/KIT |
| 小鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1092Z | 200ml/KIT |
| 豚鼠肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1085Z | 200ml/KIT |
| 鸭肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1090DZ | 200ml/KIT |
| 鹅肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1090GZ | 200ml/KIT |
| 狗肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1079Z | 200ml/KIT |
| 猪肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1110Z | 200ml/KIT |
| 牛肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1086Z | 200ml/KIT |
| 羊肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1087Z | 200ml/KIT |
| 马肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1094Z | 200ml/KIT |
| 猴肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1078HZ | 200ml/KIT |
| 兔肿瘤浸润组织淋巴细胞分离液KIT | LTS10965Z | 200ml/KIT |
| 猪肠粘膜组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1110C | 200ml/KIT |
| 人骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LHU | 200ml/KIT |
| 大鼠骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LR | 200ml/KIT |
| 小鼠骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LM | 200ml/KIT |
| 豚鼠骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LGP | 200ml/KIT |
| 鸡骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LC | 200ml/KIT |
| 鸭骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LD | 200ml/KIT |
| 鹅骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LG | 200ml/KIT |
| 狗骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LDO | 200ml/KIT |
| 猪骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LP | 200ml/KIT |
| 牛骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LCO | 200ml/KIT |
| 羊骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LS | 200ml/KIT |
| 马骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LH | 200ml/KIT |
| 猴骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LMO | 200ml/KIT |
| 兔骨髓淋巴细胞分离液试剂盒 | TBD2013LRA | 200ml/KIT |
| 猫骨髓淋巴细胞分离液KIT | TBD2013LCA | 200ml/KIT |
| 骆驼骨髓淋巴细胞分离液KIT | TBD2013LCAM | 200ml/KIT |
| 虎骨髓淋巴细胞分离液KIT | TBD2013LT | 200ml/KIT |
| 熊猫骨髓淋巴细胞分离液KIT | TBD2013LPA | 200ml/KIT |
| 大鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1083PK | 200ml/KIT |
| 小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1092PK | 200ml/KIT |
| 豚鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1085PK | 200ml/KIT |
| 鸡脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1090CPK | 200ml/KIT |
| 鸭脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1090DPK | 200ml/KIT |
| 鹅脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1090GPK | 200ml/KIT |
| 狗脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1079PK | 200ml/KIT |
| 猪脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1110PK | 200ml/KIT |
| 牛脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1086PK | 200ml/KIT |
| 羊脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1087PK | 200ml/KIT |
| 马脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1094PK | 200ml/KIT |
| 猴脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1078HPK | 200ml/KIT |
| 兔脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS10965PK | 200ml/KIT |
| 鱼脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 | LTS1080FZK | 200ml/KIT |
| 猫脾脏组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1075PK | 200ml/KIT |
| 骆驼脾脏组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1076PK | 200ml/KIT |
| 虎脾脏组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1081PK | 200ml/KIT |
| 熊猫脾脏组织淋巴细胞分离液KIT | LTS1113PK | 200ml/KIT |
热门标签:B-淋巴细胞趋化因子12试剂盒,CXCL12,,elisa,B-淋巴细胞趋化因子12,elisa













