睿信生物 ELISA羊抗鼠IgG包被酶标板

一、夹心法根据操作步骤又分为一步法、两步法、三步法，三者之间的区别归纳如下：

二、ELISA竞争法和夹心法的区别：

竞争法（competitive ELISA）：
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，后的显色也愈浅。

优点：适用于小分子抗原，数据再现性很高。

缺点：整体的敏感性和特异性都较差。

竞争法示意图：

夹心法（sandwich ELISA）：

被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

优点：高灵敏、高特异性，抗原无须事先纯化。

缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

传统两步法示意图：

睿信^®一步法示意图：

竞争法和夹心法的相同点：两种方法都是检测抗原物质。

不同点：竞争法是用于检测小分子抗原物质，只有一个反应位点，没法用夹心法方法检测。而大分子抗原更适用于夹心法（也可以用竞争法），因为夹心法实验结果特异性和灵敏度更好。

注意：不同物质的适用原理可能不同，所以并没有说竞争法的一定比夹心法做的结果好，同样夹心法的也不一定比竞争法的结果好。我根据不同项目推荐佳适用方法的盒子。

三：即用型标准品（稀释好的液体标准品）和高浓度单试剂标准品（粉剂标准品）的优劣势

即用型：

优势：使用更加方便，拆开即用不需要再另外稀释，使用线性会更好

劣势：保存时间比较短，稳定性容易受保存条件和时间的影响

粉剂标准品：

优势：保存时间更长，试剂稳定性更好，可根据需求配置自己的需要的标准浓度

劣势：需要自己稀释线性浓度，操作比较麻烦，稀释线性容易出现问题