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Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9-767图片
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更新日期:2025/12/1 21:23:03
生 产 地:中国大陆
产品型号:
商家名片
陈**
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详细内容
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称 Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使GBC-SD细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/ml G418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:2~1:6传代;2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,11;D12S391:19,20;D13S317:8,12;D16S539:11,13;D18S51:14,21;D19S433:14,15.2;D21S11:30,31;D2S1338:17,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,11;D6S1043:20,20;D7S820:11,12;D8S1179:10,12;FGA:23,23;Penta E:12,12;TH01:7,10;TPOX:11,11;vWA:16,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
英文名称:13-EpijhanolCAS:133005-15-913-表泽兰醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C20H34O2纯度:≥95%植物来源:
英文名称:13-EpijhanolCAS:133005-15-913-表泽兰醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C20H34O2纯度:≥95%植物来源:
英文名称:13-EpimanoolCAS:1438-62-613-表迈诺醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C20H34O纯度:≥95%植物来源:
英文名称:14,17-Epidioxy-28-nor-15-taraxerene-2,3-diolCAS:66107-60-614,17-表二氧基-28-去甲-15-蒲公英烯-2,3-二醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C29H46O4纯度:≥95%植物来源:
英文名称:21,24-Epoxycycloartane-3,25-diolCAS:125305⁻⁷3-921,24-环氧基环安坦-3,25-二醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C30H50O3纯度:≥95%植物来源:
英文名称:21-EpiserratenediolCAS:1449-06-521-表千层塔烯二醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C30H50O2纯度:≥98%植物来源:
0077溶壁酶/细胞溶解酶/Lyticase/Lysing Enzymes,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,37340-57-12~8℃生物技术级,200 u/mg,粉末1克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,BR,10u/ul,液体3000U
中文名称: 溶壁酶
其他中文名称: 细胞溶解酶
英文名称: Lyticase
其他英文名称: Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus
产品规格: 生物技术级,200 u/mg,粉末
包装: 1克
产品规格: BR,10u/ul,液体
包装: 5KU
CAS号:37340-57-1
级别:BioChemika
活力:≥200u/mg
活力定义:One unit will produce a ΔA800 of 0.001 per min at pH 7.5 at 25℃, using a suspension of yeast as substrate in a 3 mL reaction mixture
适用范围:对大多数真菌都有较好的脱壁效果,对担子菌和子囊菌的效果最佳。其中有食用和药用真菌,如草菇、平菇、蘑菇、香菇、银耳和灵芝等,有工农业生产上的重要菌种,如产黄青霉、、酵母等,有研究遗传用的重要材料,如裂褶菌、粗糙脉孢菌、构槽曲霉等,都能用溶壁酶去壁,获得大量原生质体,分离的原生质体活性强,有再生能力
级别:BR
Cas9稳定表达的人胆囊癌细胞;GBC-SD-Cas9⁻⁷67图片活力:10u/ul
性状:悬浮液
性状:粉末
用途:生化研究。能分解真菌细胞壁,可获得高产、优质的原生质体。该酶是真菌生物工程研究的有效工具酶
保存:2~8℃
ATCC细胞



