产品展示
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9-717培养
点击次数：67
价格：￥电议
更新日期：2025/12/1 21:23:03
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
陈**
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******771
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
详细内容
公司是最专业的ATCC细胞供应商，提供突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养的报价，咨询，称技术服务，欢迎来电咨询选购。突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养 复苏操作要点：
细胞名称 突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PLC/PRF/5细胞稳定表达突变型的Cas9蛋白，该蛋白可以降低基因编辑时的脱靶效率，经2.0ug/ml Puromycin筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS；2.0ug/ml Puromycin
传代方法 1:2~1:6传代；2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X,X；CSF1PO：10,10；D12S391：15,20；D13S317：11,12；D16S539：13,13；D18S51：17,17；D19S433：11,13；D21S11：30,33.2；D2S1338：19,22；D3S1358：15,15；D5S818：12,12；D6S1043：13,21；D7S820：9,11；D8S1179：13,16；FGA：19.2,25；Penta E：10,16；TH01：8,8；TPOX：8,8；vWA：15,16；
同工酶
染色体
使用权限 A类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养 操作步骤：
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
英文名称：24,25-Dihydroxycycloartan-3-oneCAS：155060-48-324,25-二羟基环木菠萝烷-3-酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C30H50O3纯度：≥95%植物来源：
英文名称：24,25-Dihydroxydammar-20-en-3-oneCAS：63543-53-324,25-二羟基达马树脂-20-烯-3-酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C30H50O3纯度：≥95%植物来源：
英文名称：28-DeoxonimbolideCAS：126005-94-528-去氧代印苦楝内酯用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C27H32O6纯度：≥98%植物来源：
英文名称：2-Deacetoxytaxinine BCAS：191547-12-32-去乙酰氧基紫杉素 B用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C35H42O9纯度：≥95%植物来源：
英文名称：2-Deacetyl wilformineCAS：72229-33-52-羟基泽兰内酯用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C15H20O4纯度：≥98%植物来源：
M0026过氧化氢酶（牛肝）/氯化酵素/接触酶/触酶/过氧化氢放氧酶/过氧化氢酵酶/血中氧化酶/CAT，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，CAS:9001-05-2保存：-20℃BR，2000-5000u/mg1克
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，5克
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，25克
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，高纯，20000U/mg1克
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，5克
中文名称： 过氧化氢酶（牛肝）
其他中文名称： 氯化酵素；接触酶；触酶；过氧化氢放氧酶；过氧化氢酵酶；血中氧化酶
英文名称： CAT
其他英文名称： Catalase(bovine liver)；H2O2 oxidoreductase
产品规格： BR，2000-5000u/mg
包装： 1克/5克/25克
产品规格： 高纯，20000U/mg
包装： 1克/5克
CAS号：9001-05-2
级别：BR
分子量：～250KDa
活力：2000～5000u/mg
活力定义：1u指在pH 7.0，25℃条件下每分钟分解1.0 μmole的H2O2，同时H2O2的浓度会从10.3 降低到 9.2 mM
PH：5.0～8.0
级别：High purity grade
分子量：250kDa
活力：≥20000u/mg
活力定义：One unit will decompose 1.0 μmole of H2O2 per min at pH 7.0 at 25℃, while the H2O2 conc. falls from 10.3 to 9.2 mM, measured by the rate of decrease of A240
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养性状：深褐色粉末，溶于水和稀缓冲液。用温水可溶，温度控制在40～45℃，55℃以上失活，不溶于有机溶剂。干燥时在室温中稳定。Ca2+对其有保护和激活作用。一种氧化还原酶。该酶可将过氧化氢氧化为氧，与此同时将另一分子过氧化氢还原为水
用途：生化研究。常用诊断用酶。配合偶联反应，测定葡萄糖等。食物防腐、分解过氧化氢。
保存：-20℃
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷17培养培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2）公司细胞资源中心承诺尽最大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，中心不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考。
4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
ＡＴＣＣ细胞
