产品展示
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9-716操作步骤
点击次数：163
价格：￥电议
更新日期：2025/12/1 21:23:03
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
陈**
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******771
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
详细内容
细胞名称 突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PLC/PRF/5细胞稳定表达突变型的Cas9蛋白，该蛋白可以降低基因编辑时的脱靶效率，经2.0ug/ml Puromycin筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS；2.0ug/ml Puromycin
传代方法 1:2~1:6传代；2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X,X；CSF1PO：10,10；D12S391：15,20；D13S317：11,12；D16S539：13,13；D18S51：17,17；D19S433：11,13；D21S11：30,33.2；D2S1338：19,22；D3S1358：15,15；D5S818：12,12；D6S1043：13,21；D7S820：9,11；D8S1179：13,16；FGA：19.2,25；Penta E：10,16；TH01：8,8；TPOX：8,8；vWA：15,16；
同工酶
染色体
使用权限 A类
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤 注意事项：
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
英文名称：22-DehydroclerosterolCAS：26315-07-122-脱氢赤桐甾醇用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C29H46O纯度：≥95%植物来源：
英文名称：22-Dehydroclerosterol glucosideCAS：143815-99-022-脱氢赤桐甾醇葡糖苷用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C35H56O6纯度：≥95%植物来源：
英文名称：22-Dehydroclerosteryl acetateCAS：28594-00-522-去氢赤桐甾乙酸酯用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C31H48O2纯度：≥95%植物来源：
英文名称：23-Deoxojessic acidCAS：215609-93-1(1ALPHA,3BETA,4ALPHA)-1,3-二羟基-24-亚甲基-9,19-环羊毛甾烷-28-酸用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。公式：C31H50O4纯度：≥98%植物来源：
M0025脂肪酶（假丝酵母）/脂酶/脂肪水解酶/脂肪分解酵素/三酰基甘油酰基水解酶/微生物脂肪酶/Lipase(Candida)，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，9001-62-12～8℃BR，5000u/g1克
中文名称： 脂肪酶（假丝酵母）
其他中文名称： 脂酶；脂肪水解酶；脂肪分解酵素；三酰基甘油酰基水解酶；微生物脂肪酶
英文名称： Lipase(Candida)
其他英文名称： Lipase from Candida；Microbial lipase
产品规格： BR，5000u/g
包装： 1克
CAS号：9001-62-1
级别：BR
分子量：一般在67000
活力：≥5000u/g
干燥失重：≤8.0%
温度稳定性：40度以下稳定，超过50度将严重失活。短时间以40～42度为宜，长时间以38～40度为宜
PH稳定性：以PH7.0～7.5为宜
突变型Cas9稳定表达的人肝癌细胞；PLC/PRF/5-mCas9⁻⁷16操作步骤性状：灰褐色或浅灰色粉末。微生物菌种：解脂假丝酵母（cam licla lipo lytica）。最适温度35～37℃。酶反应：甘油三酯+H2O＝甘油二酯+脂肪酸阴离子。对一级酯基团最易水解。甘油单酯是差的底物。有两个差不多相同的同工酶脂肪酶： A与B。等电点(pI)A为4.9、 B为5.0。吸光系数(E1%280)13.3。激活剂为钙(CA2+)。
用途：生化研究。脂肪水解过程中起催化作用的酶。在工业上用于油脂水解制脂肪酸、皮革脱脂、洗涤剂行业等
保存：2～8℃
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
ＡＴＣＣ细胞
