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上海谷研实业有限公司 主营产品:细胞/菌种/elisa试剂盒/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 生命科学 > 细胞分析 > 其他 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 原代细胞 > 大鼠主动脉外膜成纤维细胞

大鼠主动脉外膜成纤维细胞

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 9:43:53

产品摘要:大鼠主动脉外膜成纤维细胞公司现货出售的商品:1nmol EcoR I-Not I-BamH I接头 EcoR I-Not I-BamH I Adaptors -20℃保存
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详细内容

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品信息:
产品名称:大鼠主动脉外膜成纤维细胞
规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号:GOY-01X1323
分类:原代细胞
产品详细介绍:
名称大鼠主动脉外膜成纤维细胞
2.组织来源:主动脉组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠主动脉外膜成纤维细胞分离自主动脉血管外膜组织;血管外膜是由疏松结缔组织组成,其中含螺旋状或纵向分布的弹性纤维和胶原纤维。血管壁的结缔组织细胞以成纤维细胞为主,当血管受损伤时,成纤维细胞具有修复外膜的能力。有的动脉中膜和外膜的交界处,有密集的弹性纤维组成的外弹性膜。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5⁻⁷天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。血管外膜成纤维细胞是血管外膜的主要组成细胞之一,其主要生理功能合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
5.方法简介:
()实验室分离的大鼠主动脉外膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
()实验室分离的大鼠主动脉外膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
产品货号CM-R219
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态成纤维细胞样
传代特性可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液0.25%胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%

实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
CXCL15/Lungkine 趋化因子CXCL15抗体规格: 0.2ml EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
GCK/Glucokinase 葡萄糖激酶抗体规格: 0.1ml EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 抗體 (PE), 兔單抗 FCM 25 Test
GCS/glucosylceramide synthase 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体规格: 0.1ml EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
Plzf 早幼粒 白血病锌指蛋白抗体规格: 0.2ml EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
CSF3/G-CSF 粒 -巨噬 集落刺激因子3抗体规格: 0.1ml ADAM15 抗體 (PE), 兔單抗 FCM 25 Test
GDIA1 肿瘤转移抑制基因GDIA1抗体规格: 0.1ml TRAIL R2 / TNFRSF10B / CD262 抗體 (PE), 兔單抗 FCM 25 Test
GDIA2/ARHGDIB 肿瘤转移抑制基因GDIA2抗体规格: 0.1ml BID 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
G-CSFR/CD114 粒 -巨噬 集落刺激因子3受体抗体规格: 0.1ml TROP-2 / TACSTD2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
GKRP 葡萄糖激酶调节蛋白抗体规格: 0.2ml Latexin / Lxn 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
GDF-1 生长、分化因子1抗体规格: 0.1ml Endoglin / CD105 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
GDF3 生长分化因子3抗体规格: 0.1ml CD27 / TNFRSF7 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
特价供应 扑酸标准品 CAS: 130-85-8  规格: 250mg
特价供应 泮库溴铵标准品 CAS: 15500-66-0  规格: 200mg
特价供应 泛醇消旋体标准品 CAS: 16485-10-2  规格: 200mg
大鼠主动脉外膜成纤维细胞特价供应 泛酯标准品 CAS: 599-04-2  规格: 500mg
特价供应 泮托拉唑钠标准品 CAS: 138786-67-1  规格: 200mg
特价供应 泮托拉唑相关物质A标准品 CAS: 127780-16-9  规格: 25mg
进口短链脱氢还原酶13抗体,现货供应,请询价
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进口短链脱氢酶/还原酶家族X抗体,现货供应,请询价
进口短链脱氢酶/还原酶家族4抗体,现货供应,请询价
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进口DNAJC7蛋白抗体,现货供应,请询价

热门标签:大鼠主动脉外膜成纤维细胞

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