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上海谷研实业有限公司 主营产品:细胞/菌种/elisa试剂盒/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 生命科学 > 细胞分析 > 其他 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 原代细胞 > 大鼠小脑颗粒细胞

大鼠小脑颗粒细胞

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/16 9:17:10

产品摘要:大鼠小脑颗粒细胞公司现货出售的商品: 0.156-10 ng/ml ELISA Kit for Human C-Jun-amino-terminal kinase-interacting protein 4 31.2-2000 pg/mL 人斯钙素2(STC-2)ELISA试剂盒 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Stanniocalcin-2 0.312-2

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产品完善度: 访问次数:549

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旗舰版网址:http://www.elisagoy.com

详细内容

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产品信息:
产品名称:大鼠小脑颗粒细胞
规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号:GOY-01X1043
分类:原代细胞
产品详细介绍:
名称大鼠小脑颗粒细胞
2.组织来源:脑组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠小脑颗粒细胞分离自小脑皮层组织;神经元是神经系统基本的结构与功能单位,小脑颗粒神经元是体积较小的神经元,直径约10μm,在中枢神经系统中含量非常丰富,近乎神经元数量的一半。由于小脑神经元的生长、分化和大脑皮层神经元相似,而且数量多、便于取材,因此小脑颗粒神经元是研究神经元生长发育、神经轴突再生及神经疾病发生机制和临床神经药理的重要手段。小脑颗粒神经元是小脑主要的中间神经元,在哺乳动物的小脑内数量为丰富。颗粒神经元的轴突与苔状纤维和爬行纤维相联系,形成小脑皮层内的神经元环路,在小脑的神经活动中起着非常重要的作用。在动物传染性海绵状脑病中,病变可波及小脑颗粒神经元,导致小脑皮层的神经元环路受损,从而呈现神经性行为失调。研究小脑颗粒神经元在动物传染性海绵状脑病病理学变化中的反应、病理发生的机理特别是分子机理,有赖于小脑颗粒神经元细胞模型的建立。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维,正是这种排列保证了兴奋的单向传导,这是小脑功能理论中的关键假设,小脑颗粒细胞通过g-氨基丁酸接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。
5.方法简介:
()实验室分离的大鼠小脑颗粒细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
()实验室分离的大鼠小脑颗粒细胞经NSE免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
包被条件PLL(0.1mg/ml)
培养基含B-27、Penicillin、Streptomycin等
产品货号CM-R112
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态神经元细胞样
传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液0.25%胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%

实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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热门标签:大鼠小脑颗粒细胞

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