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上海谷研实业有限公司 主营产品:细胞/菌种/elisa试剂盒/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 生命科学 > 细胞分析 > 其他 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 原代细胞 > 人肝窦内皮细胞

人肝窦内皮细胞

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 9:43:53

产品摘要:人肝窦内皮细胞公司现货出售的商品: 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Neurotrophin-3 93.75-6000 pg/mL 人神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 93.75-6000 pg/mL ELISA Kit for Human Neurotrophin-4 78-5000 pg/mL 人5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒

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详细内容

产品信息:
产品名称:人肝窦内皮细胞
规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号:GOY-01X0866
分类:原代细胞
产品详细介绍:
名称人肝窦内皮细胞
2.组织来源:肝脏组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之端且于右边肾脏的方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹壁,肝上面则与膈及腹壁相接。肝窦内皮细胞(SEC)是肝脏内所占比例高的非实质细胞,位于肝窦腔与肝细胞之间,具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时,肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失,内皮下基膜形成,产生类似于连续型毛细血管的结构,这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起,其过程复杂,在多种肝病的发病期阶段均有出现,近年来受到广泛关注。
5.方法简介:
()实验室分离的人肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法,并通过内皮细胞用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
()实验室分离的人肝窦内皮细胞经CD31、CD14免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
包被条件PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
产品货号CM-H047
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态内皮细胞样
传代特性可传1-2代
消化液0.25%胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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热门标签:人肝窦内皮细胞

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