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小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类（MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ）酶联免疫分析试剂盒双抗体夹心法(检测未知抗原)
点击次数：423发布时间：2023/9/11 15:51:14
小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类（MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ）酶联免疫分析试剂盒双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
elisa试剂盒的提纯方法:
1、蒸馏：对于易挥发的试剂，如常用的无机酸，有机溶剂等是比较常用的提纯方法，根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。
2、升华：对于某些易升华的试剂，如碘、萘等，此法比较简便。
3、重结晶：适用于大多数固体试剂的提纯，其关键是选择好合适的溶剂。
4、溶剂萃取：无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中，均可达到提纯的目的。
5、离子交换色谱分离。（内容仅供参考，有问题或遇到问题请在线咨询，我们会竭诚为您服务）
