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鸡血管内皮细胞生长因子ELISA试剂盒检测样本加样的步骤详解

点击次数:3191 发布时间:2020/12/28 13:55:40

鸡血管内皮细胞生长因子elisa试剂盒检测样本加样的步骤详解:

1.细胞上清:处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100p1即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
2.脑脊液:处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100W1即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
3.血清血浆:加入50u山样本分析緩冲液后加50u标本如稀释量大,请将样本与样本分析緩神液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100u。
①血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液。
②血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检測,标本收集后请分装冻存于-20℃,避免反复冻融。
③血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂。
④标本应清澈透明,检测样本中如有悬浮物应通过离心去除。
⑤请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
4.组织匀浆液的样本:要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酧降解,造成检测结果的值偏低。因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入50u样本分析緩冲液后加50u标本,需稀释时,请将样本与样本分析緩神液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。
结 果 判 断 与分析:
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的指标标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度, 再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
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