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犬脂肪酸结合蛋白elisa检测试剂盒主要操作技巧说明

点击次数：3213 发布时间：2020/7/29 15:29:16

脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding proteins FABPs)是一组低分子量(14-15 KD 左右)结合长链脂肪酸的胞质蛋白FABPs 分布于哺乳动物的心肌小肠肝脏脂肪组织脑表皮等组织细胞中. FABPs 以其在组织中的分布而命名包括心肌型(H-FABP) 小肠型(I-FABP) 肝脏型(LFABP)脂肪细胞型(A-FABP) 脑细胞型(B-FABP) 肾脏型(K-FABP) 骨骼肌型(S-FABP) 牛皮癣相关型(PAFABP)及表皮型(E-FABP)等9 种类型具有组织特异性。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。。

犬脂肪酸结合蛋白elisa检测试剂盒操作技巧：

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18 C～25℃）、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等，要先查看水育箱温度，elisa试剂盒是否符合要求。

2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次第要与说明书一起，否则可导致效果过错，试验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗刷次数不要逾越说明书举荐的洗刷次数，洗液在反应孑L内停留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，形成孔问污染，导致假阴性或假阳性。

4.要保证加液量一起我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，形成显色不一致，判别过错。

5.显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，避免显色过强。

为了减小过失，是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问，我公司技术人员是这样说明的：

1. 前者测的是稀释和移液的过失，后者只需移液过失。

2. 一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。

3. 由于是从同一原液稀释，一般不考虑稀释过失(稀释过失是存在的)，都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释，这样可以使稀释过失减小)。

4. 复孔是为了扫除移液体积，板的影响，以及其他系统过失的，要求复孔的浓度是一起的。稀释后分孔能满意此要求，逐个稀释不能。

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