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绿色荧光蛋白标记的人胚肾细胞冷冻管应如何解

点击次数:3303 发布时间:2020/5/8 14:35:58

绿色荧光蛋白标记的人胚肾细胞:
1、冷冻管应如何解
取出冷浜管后,须立即放入37て水槽中快速解,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,즌则易发
生污染情形。另冷冻管由液気桶中取出解
须注意安全,预防冷冻管之爆酸。
2.细抱冷冻管择冻培养时,是否应马上云除DMS
除少数特别注明对DMSO敦感之细抱外,绝大部分细株(包括暴浮性细),在解冻之后,应直接放入全有10-15ml新鲜培养基之
培养角瓶中,待天再置换新培养基以云DMSO可,如比可避免大部分解后胞无法生长或贴之问题。
3、可否使用与原先培养条件不司之血清种类?
不能。血清是细記培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种关和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来三不同物科的血清在一些物质或分子的量或内容物上都有所不司,血清使用错误常会造成细抱无法存活。
实验要点及说明:
1.绿色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-EGFP说明书本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

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