如何提高慢病毒对细胞的感染效率？_技术交流_技术文章

慢病毒对细胞的感染效率受多个因素影响，如细胞自身生长的状态，细胞数量，细胞被慢病毒感染的难易程度等。因此保证细胞正常增殖，轮廓清晰，合适的细胞密度，选择最you的感染条件可以更好的保证感染效率。对于悬浮细胞，可采用离心感染方法，减少病毒感染时的体积，从而提高感染效率。如将细胞培养板密封后，用平角转子离心机 1000 g 离心 1 h，再放回培养箱中正常培养。

那么慢病毒在感染细胞中有什么优良表现呢？

慢病毒感染细胞的步骤一般是这个样子的，以「24 孔培养板、贴壁细胞」为例：

Day0: 接种细胞

每孔按 5×104 个待感染细胞铺板，用含有 10% FBS 的 DMEM 培养基培养;

Day1: 细胞感染

感染前，根据说明书用完全培养基配置感染液，备用吸掉旧培养基，更换为感染液; 并参考细胞 MOI 值，计算病毒使用量，加入病毒进行感染，混匀;

Day2

病毒感染 8~16 h 后，换回常规培养基，继续培养;

Day3~4: 确认感染效果

感染 72 h 后，显微镜下观察感染效果，如 EGFP、Cherry 的表达情况；

如果都这么简单的话，那你真的是 too young too simple！

那么在慢病毒感染细胞过程中，到底会遇到哪些问题呢？此贴统统帮您搞定~~

难感染问题该如何解决？

对于一些较难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等，可以通过添加病毒感染增强液来显著提高转染效率。

除了难感染外，感染效率低和加入慢病毒后，细胞死亡也是科研的又一拦路虎。

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