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细胞株构建的实验

点击次数：3781 发布时间：2018/11/13 10:26:28

实验外包最大的意义就是能够在顾客把的实验所需要的相关要求和资料转交给可以承担这项的机构或者团体，最后在双方合作下得到双方都满意的结果，最终实现双赢。稳定细胞株构建的实验就很好的反映出了这一个特点。

这项实验外包的具体流程简单来说就是根据细胞特点、实验特点或实验需求，设计实验方案并与客户讨论确定实验方案，进行预实验，通过转染含有GFP报告基因的质粒确定最佳转染试剂，并优化转染条件，杀伤曲线绘制，转染质粒，铺板，用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆，qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。好处就是经过系统的优化，通过采用已完善的病毒介导方法建立稳定细胞系。通过病毒介导，将外源基因或RNAi序列导入到靶细胞内，与宿主细胞基因组整合，再通过抗性素筛选，得到稳定表达或干扰的细胞株。

在这篇文章中，研究人员利用串联转录因子反应元件（catTFRE， concatenated tandem array of the consensus TFREs）技术应用于小鼠32个组织和器官的转录因子鉴定中，绘制了整个小鼠在组织器官水平上的转录因子定量图谱。通过对大规模数据的整合与生物信息学分析，发现了在各个层次中起重要功能的转录因子，包括普遍表达转录因子，组织保守性转录因子以及组织决定性转录因子（ttmTF）。

研究人员利用小鼠2/3肝切除再生实验证实，在器官组织发生剧变时，ttmTF会显著下调，丧失一部分器官原有的特性。该研究揭示了转录因子在小鼠各个不同器官的表达情况，为整个蛋白质组学研究填补了这一领域的空白。该项研究对于理解转录因子调控基因表达以及开展相应的基础和转化医学具有重要的理论指导和应用价值。

实验外包中使用到的病毒介导的方法建立稳定细胞系具有稳定性强，效率高，表达时间长，成本低的特性，可大大节省实验时间，为后续实验奠定基础，更能使顾客和实验方实现双赢。

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