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监控细胞周期的方法

点击次数:3701 发布时间:2018/9/4 10:15:04

周而复始,循环往复。细胞周期是一个紧密协调的过程,直接影响着所有真核细胞的生长、发育和复制。细胞周期的失调也与许多疾病状态存在关联,尤其是癌症,因此,准确监控细胞周期的进程,能够帮助研究人员更好地了解它控制下的各种机制。

TTP Labtech的应用主管Paul Wylie表示:“监控细胞周期的最简单方法是对细胞进行计数,从而评估细胞的增殖情况。最常用的方法是利用便宜的染料和简单的分析技术来确定DNA含量,比如显微镜或流式细胞术。”

“不过,尽管这些方法能提供不少信息,可用来鉴定细胞周期中每个阶段的细胞,但它们代表的是一种‘全局视角’。为了更加详细地研究每个阶段,研究人员更倾向于采用免疫染色的方案,他们利用商业化的抗体来检测特定蛋白的周期表达,”他说。

TTP Labtech的的产品经理Sarah Payne则表示:“流式细胞仪容易堵塞那是出了名的,这个因素大大影响了它在自动化分析中的应用。基于显微镜的方法虽然能够代替流式分析,但它产生的大量数据以及对专业操作人员的要求,也带来了不少挑战。”

为此,TTP Labtech开发出acumen® Cellista高内涵分析平台。据介绍,这台强大的仪器采用创新的激光扫描细胞成像技术,能够在5分钟内读取和分析1536孔板上所有细胞的细胞周期。因此,每天分析的化合物可以达到15万种。除了快速的多参数分析,acumen Cellista也支持用免疫荧光方案进行多重分析,以分析不同标志物的表达。

ChromoTek的营销经理Christoph Eckert指出,目前用来监控细胞周期的许多技术,比如碘化丙啶(PI)染色细胞的流式分析,或细胞周期标志物的免疫染色,都需要在分析前进行细胞固定。

“相比之下,我们的Cell Cycle Chromobody®(CCC)通过突出一种内源的细胞周期标志物蛋白,增殖细胞核抗原(PCNA),让研究人员能够实时分辨活细胞的动态变化。尽管以往人们也通过PCNA的过表达来监控细胞周期,但CCC不改变PCNA的内源性表达水平,因此对细胞周期进程没有影响。”

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