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人结肠平滑肌细胞培养试剂盒品牌【Human Colon PrimacellTM:Normal Colonic Smooth Muscle Cells】
人结肠平滑肌细胞提取于人结肠组织,平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。其中,肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚,结肠平滑肌细胞在IL-1beta and TNF-alpha的刺激下分泌IL-6,显著诱发机体全身的炎症反应。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。 虽然人结肠组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的人结肠组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的人结肠组织片能使得人结肠组织中人结肠平滑肌细胞的一些功能特性发生改变,从而将人结肠平滑肌细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的结肠平滑肌细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的人原代结肠平滑肌细胞中成纤维细胞的含量。 人结肠平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养人的结肠平滑肌细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM人结肠平滑肌细胞组织解离液(3×1ml) (2)人结肠平滑肌细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM人结肠平滑肌细胞成纤维抑制剂(1ml(500X)) (4)人结肠平滑肌组织洗液(5 x 100 ml) (5)人结肠平滑肌细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml) (6)人结肠平滑肌细胞基础培养基(5 x 100ml) (7)人结肠平滑肌组织预备液 (1 x 100 ml) (8)人结肠平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书

人结肠平滑肌细胞培养试剂盒品牌运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.人结肠平滑肌细胞培养试剂盒品牌细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人结肠平滑肌细胞培养试剂盒品牌培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

-3- -5- methyl pyridineCAS号:1203499-46-0分子量: C7H8ClNO
6-[2-(1,1-二甲乙)-5-(6-甲-2-吡)-1H-咪唑-4-]喹喔啉分子式:英文名称:6-[2- (1,1- two -5- (methyl ethyl) 6- methyl imidazole -2- pyridine) -1H- -4-] quinoxalineCAS号:356559-20-1分子量: C21H21N5"
"泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis人肾动脉平滑肌细胞完全培养基
大鼠子宫颈上皮细胞完全培养基酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中华根瘤菌
PA-1(人卵巢腺细胞)A549, 人肺细胞系
植物杆菌 Lactobacillus plantarum酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti香菇 Lentinula edodes
NIH 3T3/小鼠成纤维细胞Caki-2(人肾透细胞细胞)
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
日本根霉产色链霉菌 Streptomyces chromogenes
人结肠细胞人卵巢上皮细胞完全培养基
2-三氟甲-4-吡甲醛分子式:英文名称:2- three -4- pyridine formaldehydeCAS号:108338-20-1分子量:
2-羟分子式:101.15英文名称:2- piperidineCAS号:45506-41-0分子量: C5H11NO
人结肠平滑肌细胞培养试剂盒品牌4-(N,N-二甲磺酰)⁻⁷-嗪并氧杂恶二唑分子式:311.36英文名称:4 -(N,N-二甲磺酰)- 7 -嗪并氧杂恶二唑CAS号:139332-64-2分子量: C12H17N5O3S
乙二甲英文名称:Ethylene glycol methyl ether分子式:76.09分子量: C3H8O2CAS号:109-86-4
三氧二锰分子式:157.87英文名称:Three manganese oxide twoCAS号:1317-34-6分子量: Mn2O3
9-(4-)咔唑分子式:369.21英文名称:9- (4- p-iodophenyl) carbazoleCAS号:57103-15-8分子量: C18H12IN
2-氯-5-甲吡分子式:127.57英文名称:2- -5- methyl pyridineCAS号:18368-64-4分子量: C6H6ClN
DBD-F分子式:245.23英文名称:DBD-FCAS号:98358-90-8分子量: C8H8FN3O3S
盐酸赛洛唑啉分子式:280.84英文名称:Xylometazoline hydrochlorideCAS号:1218-35-5分子量: C16H25ClN2
金黄偶氮染料Y英文名称:Golden yellow azo dye Y分子式:分子量:CAS号:"