反应五要素:
猪鞭虫PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
以下是
猪鞭虫PCR检测试剂盒说明书详细介绍:产品名称:
猪鞭虫PCR检测试剂盒说明书英文名称:Trichuris suisPCR
编号:GOY-R10380

需要自备的器材:
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:1.猪鞭虫PCR检测试剂盒说明书 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
我公司即用型PCR试剂盒:
运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
本产品是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
无盐麦康凯琼脂 (CM0007b) Oxoid
缓冲蛋白胨水 (CM0509) Oxoid
卡里-布莱尔转运培养基 (CM0519) Oxoid
Giolitti-Cantoni 肉汤 (CM0523) Oxoid
SS 改良琼脂(CM0533) Oxoid
Dermasel 琼脂 (CM0539) Oxoid
沙保氏麦芽糖琼脂 (CM0041a) Oxoid
产气荚膜菌琼脂基础 (OPSP) (CM0543) Oxoid
土霉素葡萄糖酵母提取物选择性培养基(OGYE培养基) (CM0545) Oxoid
虎红氯霉素琼脂基础 (CM0549) Oxoid
假单胞菌琼脂基础 (CM0559) Oxoid mphotericin B solubilized 可溶性两性霉素B 25mg 支
Scutellarein 野黄芩素 529-53-3 20mg
猪鞭虫PCR检测试剂盒说明书Loganic acid 马钱苷酸 22255-40-9 20mg
β-Dextranase β-葡聚糖酶 5g 瓶
α-Glucosidase a-葡萄糖苷酶 5g 瓶
β-galactosidase β-半乳糖苷酶 1KU 瓶
Papain 木瓜蛋白酶(细胞培养级) 100mg 瓶
Glucose oxidase 葡萄糖氧化酶 10ku 瓶
Albumin Egg 卵清蛋白 100g 瓶
PBR322 20ug 支
酚:仿=25:24(pH>7.8) 500ml 瓶
兔抗小鼠IgG 1mg 支
DAB 3,3'-二氨基联苯胺四盐酸 1g 瓶
十六烷三甲基溴化铵琼脂 (CM0579) Oxoid