使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
Sodium-chloride peptone broth(buffered) 氯化钠蛋白胨肉汤(缓冲) 1.10582.0500MERCK默克
Sorbitol-MacCONKEY agar(SMAC agar)SMAC琼脂/山梨醇麦康凯琼脂 1.09207.0500MERCK默克
SPS agar ANGELOTTI perfringens selective agar SPS琼脂/ANGELOTTI 1.10235.0500MERCK默克
产气荚膜菌选择琼脂梭
SS agar Salmonella-Shigella agar SS琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂 1.07667.0500MERCK默克
SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 琼脂/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂(含脱氧胆盐氯化钙) 1.16724.0500MERCK默克
Standard count agar标准计数琼脂 1.01621.0500MERCK默克
Standard nutrient agar标准I营养琼脂 1.07881.0500MERCK默克
Standard nutrient broth 标准I营养琼脂 1.07882.0500MERCK默克
Standard 11 nutrient agar标准11营养琼脂 1.07883.0500MERCK默克
Staphylococcus enrichment broth( base)acc.to BAIRD葡萄状球菌富集肉汤(基础) 1.07899.0500MERCK默克
TB medium acc.to LOENSTIN-JENSEN( base) TB培养基(基础) 1.05400.0500MERCK默克
TCBS agar Vibrio selective agar TCBS琼脂/弧菌选择琼脂 1.10263.0500MERCK默克
Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT测试琼脂(残余测试) 1.10662.0500MERCK默克超滤离心管 4ml-3KD 4ml 个
D-Panthenol D-泛醇 100g 瓶
Triton X-100 曲拉通X-100 500ml 瓶
酸和盐
文氏密螺旋体PCR检测试剂盒费用钙荧光探针Fluo-4, AM 100 μg 支
Bromphenol Blue 溴酚蓝 5g 瓶
MaecrozymeR-10 离析酶R-10 1g 瓶
Guanosine5-Diphosphate (GDP) 10mg 瓶
2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料) 5×1ml 瓶
anti-β-actin Rabbit Polyclonal antibody 100ul 瓶
人纤维蛋白原 10mg 支
Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ 100g 瓶
SP-Sepharose HP SP-琼脂糖凝胶 HP 100ml 瓶
Q-Sepharose HP Q-琼脂糖凝胶 HP 100ml 瓶
Sepharose 6FF 琼脂糖凝胶6FF 100ml 瓶
反应五要素:
文氏密螺旋体PCR检测试剂盒费用参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。