产品名称:牛津琼脂(OXA)基础品牌
英文名称:Oxford Agar Base
产品规格:250g
产品用途:用于单增李氏菌的选择性分离(SN标准)
成分(g/L)
特殊蛋白胨 23.0g
可溶性淀粉 1.0g
氯化钠 5.0g
七叶苷 1.0g
柠檬酸铁铵 0.5g
氯化锂 15.0g
琼脂 13.0g
PH值 7.0±0.2
用 法
称取本品5.85克,加热溶解于100ml蒸馏水中, 121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃时,加入多粘菌素E(2mg)、放线菌(40mg)、吖啶黄素(0.5mg)、头孢双硫唑甲氧(0.2mg)、磷霉素(1mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。
牛津琼脂(OXA)基础品牌培养和保存:
1)干粉,买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。
2)配好的无血清培养基一定保存在4度,保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。
3)加入血清的培养基,最好保存在4度不要超过1个月,从时间太长,活性下降。当然稍微长点也不一定出问题。但是根据细胞而定;如果原代培养,最好新鲜,如果是肿瘤细胞,或仅维持传代就不太要紧。但是原则是越新越好。
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定的效价等方面。培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。牛津琼脂(OXA)基础品牌实验内容 :
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 牛津琼脂(OXA)基础品牌的步骤:(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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