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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 分子试剂 > RNA提取纯化 > 细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)

细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/5 9:41:24

产品摘要:细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)正在出售的产品:磷酸化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857) 磷酸化血小板源性生长因子受体α/β抗体
磷酸化α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体Anti-PDGF Receptor

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产品完善度: 访问次数:1490

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品属性:
中文名称:细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)
英文名称:Bacterial total RNA Extraction Kit
产品规格:50次
产品货号:GOY-F9637
本试剂盒是在无、RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱,基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的,等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.关于DNA的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留),本试剂盒提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1)选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4)在步骤去蛋白液RW1漂洗,直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
5.RNA纯度及浓度检测:
完整性:RNA可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE电泳缓冲液;150v,15分钟)检测完整性。由于细胞中70%~80%的RNA为rRNA,电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA条带。动物rRNA大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S和18S rRNA。动物RNA样品中大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5~2.0倍,否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280读数(10mMTris,pH7.5)在1.8~2.1之间。OD260/OD280读数受测定所用溶液的pH值影响。同一个RNA样品,假定在10mM Tris,pH7.5溶液中测出的OD260/OD280读数1.8~2.1之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5~1.9之间,但这并不表示RNA不纯。
浓度:取一定量的RNA提取物,用RNase-free水稀释n倍,用RNase-free水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260,OD280测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件:室温,有效期6个月
本制品别名:细菌RNA快速提取试剂盒|快速提取细菌RNA试剂盒
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2.在适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(*—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)酶联免疫试剂盒乙酸钠 98%穗花牡荆甙 分析标准品,≥98% 酵母浸粉;酵母粉
肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)酶联免疫试剂盒硫代甜菜碱 12 98%桃叶珊瑚苷 分析标准品,≥98%核糖核酸酶 A 溶液
肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)酶联免疫试剂盒十二烷基硫酸钠 97%,电泳白果内酯 分析标准品,≥99%N,N'-烯酰
肝生长因子激活物(HGFA)酶联免疫试剂盒十二烷基硫酸钠 99.0%,超纯巴卡丁 III 分析标准品,≥99%D-葡萄糖一水
肝生长因子(HGF)酶联免疫试剂盒硫代甜菜碱 8 98%松果菊苷 分析标准品,≥95% 十二烷基硫酸钠(分子生物学)
肝核因子1β(HNF-1B)酶联免疫试剂盒硫代甜菜碱10 98%雪上一枝蒿甲素 分析标准品,≥97%聚乙二6000
肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)酶联免疫试剂盒二甲苯蓝FF 80%雪上一枝蒿乙素 分析标准品,≥98%吐温20
肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)酶联免疫试剂盒10.0μL微量进样器 尖头菊苣酸 分析标准品,≥98%5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环己盐(X-GLUC)
肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)酶联免疫试剂盒赤藓红B钠盐 85%分析标准品,≥97%曲拉通X-100
肝癌抗原(PHC)酶联免疫试剂盒柠檬黄 >95%(HPLC)莪术 分析标准品,≥98%胰蛋白胨
肝X受体β(LXRβ)酶联免疫试剂盒六甲基二硅氧烷 99%α-藏花素 分析标准品,≥98%生物素;D-生物素;维生素 H 辅酶 R
肝X受体α(LXRα)酶联免疫试剂盒六甲基二硅氧烷 NMR grade, 99.7%天名精内酯酮 23438甘油
甘油三酯(TG)酶联免疫试剂盒六甲基二硅烷 AR,98%西红花苷Ⅱ 分析标准品,≥95%柠檬酸钠二水;柠檬酸三钠二水
甘油-3-磷酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)酶联免疫试剂盒六甲基二硅烷 for GC, ≥99.0% (GC)重楼皂苷I 分析标准品,≥97%酸
甘油二酯(DAG)酶联免疫试剂盒六甲基二硅烷 CP,97%紫堇灵 分析标准品,≥97%明胶
甘露糖受体(MR)酶联免疫试剂盒1-萘酚 AR,99.0%1-脱氧野尻霉素 分析标准品,≥95%Bacto酵母浸粉(BD原装)
细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)(-)-Noe's Reagent
108031⁻⁷9-4
中文名: (-)-核欧沃豪斯效应试剂
别 名:
分子式:C24H38O3
性状:Powder
纯度:98.0%
2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane
2024-88-6
中文名: 2,2-双(4-氯甲酰氧苯基)丙烷
别 名:
分子式:C17H14Cl2O4
性状:Powder
纯度:98.0%
注意事项:
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后,轻摇时*与细胞充分接触,然后倒掉大部分*,利用剩余的少量*再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。

热门标签:细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)

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