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BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制剂(OF-1)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制剂(OF-1)
英文名称:OF-1
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
发货周期:1~3天
OF-1是BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制剂,Kd值分别为100nM和500nM,对BRD4结合能力弱39倍。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:919973-83-4
纯度:98.13%
分子量:440.31
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
梨形卷枝霉 N-Boc-4-甲酸乙酯IκB激酶-α检测试剂盒
假丝酵母属 4-溴-2-氟三氟甲苯IκB激酶-β检测试剂盒
鼠李糖小短杆 N,N,N-基乙二I型胶原蛋白检测试剂盒
酿酒酵母 2-溴-4-氟甲苯I型胶原羟基端肽β降解产物检测试剂盒
分枝杆 3,5-二叔丁基-4-羟基苯甲酸I型原胶原N端肽检测试剂盒
蒙古口蘑 2,5-二氟-4-硝苯Jo1抗体;抗组氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒
产气荚膜梭 素C型 3,6-二氯哒KIT Ligand检测试剂盒
链霉 马来酸二乙酯Klotho蛋白检测试剂盒
冻土毛霉 丁二酸二丁酯Klotho蛋白检测试剂盒
樟疫霉 1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷二(四氟酸)盐L1粘附分子检测试剂盒
印度芽孢杆 对氯苯乙Laminin-5;Epiligrin检测试剂盒
酿酒酵母 醋硝唑L-精氨酸检测试剂盒
斑玉蕈 乙酸-4-酚酯L-乳酸检测试剂盒
木蹄层孔 乙酰酮氧钛(IV)L选择素检测试剂盒
枯草芽孢杆枯草亚种 4-氟-3-酸Mac-2结合蛋白检测试剂盒
BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制剂(OF-1)新型金属基质蛋白酶(抗原)Anti-DOK3 Antibody猴苯丙酸诺龙/苯丙酸去甲睾酮(NP)elisa定量检测试剂盒
脂联素受体-1(抗原)Anti-DOK2 Antibody猴多药耐药相关蛋白1(MRP1)elisa定量检测试剂盒
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列腺酸性磷酸酶抗原Anti-DOK4 Antibody猴腺苷脱氨酶(ADA)elisa定量检测试剂盒
列腺酸性磷酸酶抗原(人)Anti-DOK7 Antibody兔发动蛋白1(DNM1)elisa定量检测试剂盒
P选择素抗原Anti-DP-1 Antibody兔S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)elisa定量检测试剂盒
溶酶体膜糖蛋白抗原Anti-DPF2 Antibody猴蛋白激酶C-η(PKCη)elisa定量检测试剂盒
一种肿瘤抑制基因抗原(C端)Anti-DPF2 Antibody猴弹性蛋白酶3B(ELA3B)elisa定量检测试剂盒
热门标签:BRPF1B和BRPF2bromodomain,抑制剂,OF-1













