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坏死性凋亡抑制剂(Necrostatin 2 racemate)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:坏死性凋亡抑制剂(Necrostatin 2 racemate)
英文名称:Necrostatin 2 racemate
产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
发货周期:1~3天
Necrostatin2是高活性的坏死性凋亡抑制剂,EC50为50nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:852391-15-2
别名:Necrostatin-2 racemate
纯度:99.10%
分子量:277.71
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
Anti-TP II A/TOP2a/FITC 荧光素标记DNA拓普西异构酶ⅡA抗体IgG绵羊早期生长应答蛋白3(EGR3)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRAIL/Apo2L /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗体IgG绵羊抗脂酰丝氨抗体(APSA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Transthyretin /FITC 荧光素标记转状腺素蛋白抗体IgG绵羊肌球蛋白重链1(MYH1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREM1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体1抗体IgG绵羊核孔蛋白133kda(NUP133)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREM2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体2抗体IgG绵羊肌-3-激酶(PI3K)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREML1/TLT1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体样转录因子1抗体IgG绵羊乙酰辅酶A(A-CoA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREML2/TLT2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体样转录因子2抗体IgG绵羊抗角蛋白抗体(AKA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF/FITC 荧光素标记抗转铁蛋白抗体IgG绵羊双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF1/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白1抗体IgG绵羊α-胞衬蛋白(SPTAN1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF2/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白2抗体IgG绵羊因子信号转导抑制因子3(SOCS3)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRH/FITC 荧光素标记促状腺素释放激素抗体IgG绵羊肝脏/红酮激酶(PK)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRIM32/FITC 荧光素标记TRIM32抗体IgG绵羊肝脏胶原凝集素1(CLL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TrK A/FITC 荧光素标记酪氨激酶A抗体IgG绵羊抗脂抗体(APA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 荧光素标记酪氨激酶A.B.C抗体IgG绵羊质金属蛋白酶3(MMP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 荧光素标记化酪氨激酶A抗体IgG绵羊雌激素受体α(ERα)酶联免疫吸附测定试剂盒
坏死性凋亡抑制剂(Necrostatin 2 racemate)白介素-15抗原Anti-CR2 Antibody猪II型胶原羧基端原肽(PIICP)elisa定量检测试剂盒
白介素16抗原Anti-CPN2 Antibody猪半胱氨酰白三烯受体2(CYSLTR2)elisa定量检测试剂盒
白介素-16抗原Anti-CR1 Antibody猴多肽YY (PYY)elisa定量检测试剂盒
白介素-18/干扰素γ诱导因子Anti-CRABP2 Antibody猴αL岩藻糖苷酶(FUCA)elisa定量检测试剂盒
白介素-23受体抗原Anti-CRABP2 Antibody猴黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)elisa定量检测试剂盒
白介素1α抗原Anti-CREB3 Antibody兔碳酸酐酶IX (CA9)elisa定量检测试剂盒
白介素2抗原(大、小鼠)Anti-CRABP2 Antibody豚鼠低密度脂蛋白(LDL)elisa定量检测试剂盒
IL-2抗原(人)Anti-CREBBP Antibody豚鼠半胱氨酰白三烯受体2(CYSLTR2)elisa定量检测试剂盒
热门标签:坏死性凋亡,抑制剂,Necrostatin,2,racemate













