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MEK1/2抑制剂(AZD8330)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:MEK1/2抑制剂(AZD8330)
英文名称:AZD8330
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
AZD8330(ARRY-424704;ARRY⁻⁷04)是非ATP竞争性MEK1/2抑制剂,IC50为7nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:869357-68-6
别名:ARRY-424704;ARRY⁻⁷04;AZD8330
分子量:461.23
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
Anti-TGF- Beta3/FITC 荧光素标记转移生长因子–β3抗体IgG绵羊糖化白蛋白(GA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TGF- BetaR1/ALK /FITC 荧光素标记转移生长因子–β受体1抗体IgG绵羊血小板亲和蛋白2(PKP2)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TGF- BetaR 2/FITC 荧光素标记转移生长因子–β受体2抗体IgG绵羊转录激活因子5(ATF5)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TGF- BetaR 3/FITC 荧光素标记转移生长因子–β受体3抗体IgG绵羊促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TGM3/FITC 荧光素标记转谷氨酰酶3抗体IgG绵羊促卵泡素(FSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Thioredoxin 1/FITC 荧光素标记硫氧还蛋白抗体IgG绵羊转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Thymosin Alpha-1/FITC 荧光素标记胸腺肽 α-1抗体IgG绵羊白分化抗原CD30(CD30)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Tie1/FITC 荧光素标记血管生成素-1受体抗体IgG绵羊G蛋白偶联受体120(GPR120)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Tie2/FITC 荧光素标记上皮生长因子样域酪氨激酶2IgG绵羊IgA Fc片段受体(FcaR)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC 荧光素标记化血管生成素受体2抗体IgG绵羊组氨丰富糖蛋白(HRG)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 荧光素标记化血管生成素受体2抗体IgG绵羊轴突生长诱向因子4(Ntn4)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TIEG1/KLF10/FITC 荧光素标记TGF-β诱导早期应答因1抗体IgG绵羊斑型POZ蛋白(SPOP)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-RALDH2/FITC 荧光素标记视黄脱氢酶2型抗体IgG绵羊内皮抑制素(ES)酶联免疫吸附测定试剂盒
anti-RARRES1/TIG1/FITC 荧光素标记视黄受体应答蛋白1抗体IgG绵羊G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TIGAR humen/FITC 荧光素标记兔抗人TIGAR蛋白抗体IgG绵羊β甘露糖苷酶(β Manase)酶联免疫吸附测定试剂盒
MEK1/2抑制剂(AZD8330)Flag Tag标签多肽Anti-COL20A1 Antibody猴胰淀素(IAPP)elisa定量检测试剂盒
标签DYKDDDDK Tag分支肽Anti-COL23A1 Antibody猴胚外胚层发育蛋白(EED)elisa定量检测试剂盒
T7 tag标签抗原Anti-COL25A1 Antibody猪神经肽Y受体Y5(NPYR5)elisa定量检测试剂盒
V5 tag多肽抗原Anti-COL28A1 Antibody猪肺表面活性物质相关蛋白B(SPB)elisa定量检测试剂盒
KT3 tag标签抗原Anti-COL2A1 Antibody猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)elisa定量检测试剂盒
VSV-G tag标签抗原Anti-COL3A1 Antibody猪血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)elisa定量检测试剂盒
HLA-DR抗原Anti-COL4A1 Antibody猪内质网核信号1(ERN1)elisa定量检测试剂盒
人类白抗原EAnti-COL4A4 Antibody猪胰腺再生蛋白3α(REG3α)elisa定量检测试剂盒
热门标签:MEK1/2,抑制剂,AZD8330













