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SIRT1和SIRT2抑制剂(Tenovin-1)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:SIRT1和SIRT2抑制剂(Tenovin-1)
英文名称:Tenovin-1
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
Tenovin-1是SIRT1和SIRT2抑制剂,及p21和p53活化剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:380315-80-0
纯度:99.39%
分子量:369.48
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
Anti-SSTR2 /FITC 荧光素标记生长抑素受体2(SSTR2)抗体IgG绵羊蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SSTR3/FITC 荧光素标记生长抑素受体3(SSTR3)抗体IgG绵羊胸腺五肽(TP5)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SSTR5/FITC 荧光素标记生长抑素受体5(SSTR5)抗体IgG绵羊质金属蛋白酶-10(MMP-10)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-SSTR4/FITC 荧光素标记生长抑素受体4(SSTR4)抗体IgG绵羊肝脏糖原化酶(PYGL)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT1/FITC 荧光素标记信号转导与转录激活因子1抗体IgG绵羊β球蛋白(β-Lg)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 荧光素标记化信号转导与转录激活因子1抗体IgG绵羊周期素依赖性激酶5(CDK5)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT2/FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子2(STAT2)抗体IgG绵羊γ干扰素诱导单核因子(MIγ/CXCL9)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子2抗体IgG绵羊生长激素诱导跨膜蛋白(GHITM)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT3 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子3抗体IgG绵羊凋亡相关因子(FAS/CD95/TNFRSF6)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子3抗体IgG绵羊血管紧张素I(ANG I)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT4 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子4抗体IgG绵羊多巴(DA)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子4抗体IgG绵羊组织因子(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT5/FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗体IgG绵羊分泌型卷曲相关蛋白2 (SFRP2)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STAT6 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子6抗体IgG绵羊GATA结合蛋白2(GATA2)酶联免疫吸附测定试剂盒
Anti-STEAP1/FITC 荧光素标记列腺跨膜上皮抗原1抗体IgG绵羊微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)酶联免疫吸附测定试剂盒
SIRT1和SIRT2抑制剂(Tenovin-1)糖皮质诱导肿瘤坏死因子受体抗原Anti-CMKLR1 Antibody猪转甲状腺素蛋白(TTR)elisa定量检测试剂盒
下游转录因子Gli1蛋白抗原Anti-CMPK1 Antibody猪胱天蛋白酶9(CASP9)elisa定量检测试剂盒
胰高血糖素样肽-1(多肽)Anti-CMTM1 Antibody猪β2糖蛋白(β2-GP)elisa定量检测试剂盒
胰高血糖素样肽-1(多肽)Anti-CMTM1 Antibody猪肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)elisa定量检测试剂盒
葡萄糖转运蛋白3抗原Anti-CMTM2 Antibody猴轴突生长诱向因子4(Ntn4)elisa定量检测试剂盒
粒-巨噬克隆激因子抗原Anti-CMTM2 Antibody猴白分化抗原CD97(CD97)elisa定量检测试剂盒
糖蛋白A33(跨膜)抗原Anti-CMTM4 Antibody猴促甲状腺胚胎因子(TEF)elisa定量检测试剂盒
磷脂酰基蛋白聚糖-1抗原Anti-CMTM3 Antibody猴血管紧张素III(ANG III)elisa定量检测试剂盒
热门标签:SIRT1和SIRT2,抑制剂,Tenovin-1













