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GSK-3β抑制剂(TDZD-8)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:GSK-3β抑制剂(TDZD-8)
英文名称:TDZD-8
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
TDZD-8是GSK-3β的抑制剂,IC50为2μM;对Cdk-1/cyclin?B,CK-II,PKA和PKC的作用较弱,IC50值均>100μM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:327036-89-5
别名:GSK-3β Inhibitor I;NP 01139
纯度:99.07%
分子量:222.26
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
钨粉 9.95%,<1.1μmAnti-HSA/HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体IgG鸡血小板衍生生长因子亚A(PDGFA)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钛 99%,2-4μmMouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Anti-body /FITC 荧光素标记鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克隆抗体IgG鸡核孔蛋白107kda(NUP107)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钛 99%,40nmAnti-Mouse IgA/FITC 荧光素标记兔抗小鼠IgA抗体鸡谷氨半胱氨连接酶修饰亚(GCLM)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钛 99.99% metals basisAnti-MPO /FITC 荧光素标记髓过氧化物酶抗体IgG鸡转铁蛋白受体2(TFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒
氮化钛 99%,20nmAnti-HAVCR1/KIM1/TIM1/FITC 荧光素标记型肝炎病受体1IgG鸡着丝粒蛋白I(CENPI)酶联免疫吸附测定试剂盒
氮化钛 99.5%,2-10 μmAnti-HSD11B2/HSD2 /FITC 荧光素标记羟类固脱氢酶11β2抗体IgG鸡多功能蛋白聚糖(VS)酶联免疫吸附测定试剂盒
铽粉 99.9% metals basisAnti-MR/FITC 荧光素标记盐皮质激素受体抗体IgG鸡V-Rel网状内皮增生病癌因同源物B (RELB)酶联免疫吸附测定试剂盒
一氧化钛 99.9% metals basis,粉末,100-200 meshAnti-MRAS/Mras/FITC 荧光素标记原癌因M-ras抗体IgG鸡原钙黏素15(PCDH15)酶联免疫吸附测定试剂盒
一氧化钛 99.9%,颗粒:1-5mmAnti-Mre11/HNGS1/FITC 荧光素标记DNA损伤关键蛋白Mre11抗体IgG鸡核因子-κB亚p65(NF-κB p65)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钽 99.9%Anti-Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC 荧光素标记化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体IgG鸡组织因子(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钽 99.5%,≤3 μmAnti-MRP1/FITC 荧光素标记多药耐药相关蛋白1抗体IgG鸡微管相关蛋白2(MAP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳氮化钛 powder, 1-2 μm, 99%Anti-CITED1/ABCC1/FITC 荧光素标记结合转化激活因子CITED1抗体IgG鸡破骨相关受体(OSCAR)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钨 粉末,99.9% metals basis, <10μmAnti-MRP2/FITC 荧光素标记多药耐药相关蛋白2抗体鸡甘肽/甘素受体1(GALR1)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钨 9.8%,3-20nm Anti-MRP3/FITC 荧光素标记多药耐药相关蛋白3抗体IgG鸡β位淀粉样体蛋白裂解酶1(BACE1)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钨 粉末,99.9% metals basis, ≤1μmAnti-MRP4/ABCC4 /FITC 荧光素标记多药耐药相关蛋白4抗体IgG鸡凝血酶/抗凝血酶复合物(TAT)酶联免疫吸附测定试剂盒
GSK-3β抑制剂(TDZD-8)孤菲肽受体(痛敏肽受体)(抗原)Anti-C1QL2 Antibody氧氟沙星Ofloxacin
轴索过度生长抑制因子-A(抗原)Anti-C1S Antibody依诺沙星Enoxacin
轴索过度生长抑制因子受体(多肽抗原)Anti-C2CD6 Antibody咪唑试剂Imidazole reagent
相关死亡促进因子Bad抗原Anti-C3AR1 Antibodyβ-多西环素Beta?doxycycline
相关死亡促进因子Bad抗原Anti-C5orf13 Antibody头孢噻吩Cephalothin
磷酸化相关死亡促进因子抗体Anti-C4A Antibody醌式利福平Qui?Li Fuping
Bcl-2同源拮抗剂Bak(多肽)Anti-C5AR1 Antibody林可霉素Lincomycin
一氧化氮合成酶-1(抗原)Anti-C8B Antibody环丙沙星杂质A(氟喹啉酸)Ciprofloxacin?impurity A?(fluoroquino
热门标签:GSK-3β,抑制剂,TDZD-8













