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Btk抑制剂(ONO-4059 analog)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:Btk抑制剂(ONO-4059 analog)
英文名称:ONO-4059 analog
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
这个产品是ONO-4059的类似物,ONO-405是一种高效的选择性Btk抑制剂,IC50值为sub-nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1351635-67-0
纯度:99.62%
分子量:456.5
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
罗丹明6G 高纯,95%Anti-HSP-60/FITC 荧光素标记热休克蛋白-60蛋白抗体IgG鸡XVII型胶原(COL17)酶联免疫吸附测定试剂盒
10-十一烯 95%Anti-HSP⁻⁷0/FITC 荧光素标记HSP⁻⁷0蛋白抗体IgG鸡丝氨蛋白酶23(PRSS23)酶联免疫吸附测定试剂盒
溴化锂 99.9% metals basisAnti-HSP75/TRAP-1 /FITC 荧光素标记热休克蛋白⁻⁷5抗体IgG鸡维生素D受体(VDR)酶联免疫吸附测定试剂盒
standard for GC, ≥99.9% (GC)Anti-OMPC/OMPA/FITC 荧光素标记抗外膜孔道蛋白C抗体IgG鸡黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)酶联免疫吸附测定试剂盒
for HPLC, ≥99.7%Anti-HSP-90 Alpha/FITC 荧光素标记HSP-90α蛋白抗体IgG鸡剪切修复交叉互补因1(ERCC1)酶联免疫吸附测定试剂盒
for HPLC, ≥99.5%Anti-HSP-90 Alpha/FITC 荧光素标记热休克蛋白90α抗体IgG鸡衰老关键蛋白4(FBLN4)酶联免疫吸附测定试剂盒
10X分子筛 干燥剂用Anti-HSP-90 Beta/FITC 荧光素标记HSP-90β蛋白抗体IgG鸡CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)酶联免疫吸附测定试剂盒
蒽 98%Anti-HSP27/RBITC 红色荧光素罗丹明标记热休克蛋白-27抗体IgG鸡腺苷环化酶2(ADCY2)酶联免疫吸附测定试剂盒
氧化钕 99%Anti-HSP-105/FITC 荧光素标记热休克蛋白HSP105抗体IgG鸡肌钙蛋白C2 (TNNC2)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钨 粉末,99.9% metals basis, <10μmAnti-HSTF2/HSF2 /FITC 荧光素标记热休克转录因子2抗体IgG鸡成纤维生长因子受体2(FGFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒
天青Ⅱ ARAnti-HtrA2/Omi/FITC 荧光素标记丝氨蛋白酶/线粒体丝氨蛋白酶抗体IgG鸡核孔蛋白160kda(NUP160)酶联免疫吸附测定试剂盒
火棉胶 AR,4-8% in ethanol/diethyl ether Anti-TRT/FITC 荧光素标记端粒酶抗体IgG鸡外信号调节激酶1(ERK1)酶联免疫吸附测定试剂盒
结晶紫 ACS, ≥90.0%Anti-TRT/TERT/PE 荧光素PE标记端粒酶抗体IgG鸡半胱氨酰白三烯受体2(CYSLTR2)酶联免疫吸附测定试剂盒
达旦黄 CPAnti-COX10/FITC 荧光素标记COX10抗体IgG鸡淋巴抗原6复合物因座A(Ly6a)酶联免疫吸附测定试剂盒
氟化钬(III) 无水,粉末, 99.99% metals basisAnti-IAA/FITC 荧光素标记吲哚-3-乙抗体/植物生长素抗体IgG鸡着丝粒蛋白E(CENPE)酶联免疫吸附测定试剂盒
Btk抑制剂(ONO-4059 analog)阳离子转运蛋白1Anti-AKAP5 Antibody红芪Radix HedFSari
基质金属蛋白酶-9(抗原)Anti-AKIP1 Antibody马勃Puffball
晚期糖基化终末产物特异性受体(抗原)Anti-AKIP1 Antibody一点红Emilia sonchifolia
14-3-3 蛋白(多肽抗原)Anti-AKR1C8P Antibody绿萍Azolla
植物14-3-3蛋白抗原Anti-AKR1C8P Antibody紫色姜Purple ginger
FRA-1多肽蛋白Anti-AKR1E2 Antibody沙苑子Astragalus complanatus
调亡诱导因子(多肽片断抗原)Anti-AKT1 Antibody叶下珠Ye Xiazhu
腺苷酸激酶-1Anti-ALB Antibody梨果Rosa roxburghii Tratt fruit
热门标签:Btk,抑制剂,ONO-4059,analog













