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B-Raf抑制剂(GDC-0879)
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详细内容
中文名称:B-Raf抑制剂(GDC-0879)
英文名称:GDC-0879
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
发货周期:1~3天
GDC-0879是高活性B-Raf选择性抑制剂,IC50为0.13nM,与对c-Raf的抑制性接近,对其它的激酶则无抑制活性。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:905281⁻⁷6⁻⁷
纯度:99.70%
分子量:334.37
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
硫代草氨乙酯 95%Anti-HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 荧光素标记缺氧诱导因子1β 抗体IgG鸡I型胶原交联氨端肽(NTXI)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-乙氧硫酚 98%Anti-HIF-2 Alpha/FITC 荧光素标记缺氧诱导因子2α 抗体IgG鸡纤维连接蛋白(FN)酶联免疫吸附测定试剂盒
硫乙乙酯 97%Anti-HINT1/FITC 荧光素标记组氨三聚体核苷结合蛋白1抗体IgG鸡热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-氟乙硫 96%Anti-HIRA/DGGR1/FITC 荧光素标记组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体IgG鸡酮脱氢酶激酶同工酶4(PDK4)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-氟茴香硫 98%Anti-Histone H1/FITC 荧光素标记抗组蛋白H1抗体IgG鸡蛋白C(PROC)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-氟硫代酰 98%Anti-Histone H1 (phospho Thr146) /FITC 荧光素标记化组蛋白H1抗体IgG鸡核受体相互作用蛋白1(NRIP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
劳森试剂 97%Anti-Histone H1b/FITC 荧光素标记抗组蛋白H1b抗体IgG鸡血管内皮生长因子D(VEGF-D)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-羟硫酚 96%Anti-Histone H2/HTB901/FITC 荧光素标记抗组蛋白H2抗体IgG鸡列腺素E合酶2(PTGES2)酶联免疫吸附测定试剂盒
硫乙酯 97%Anti-Histone H2B/FITC 荧光素标记组蛋白H2B抗体IgG鸡二尿核苷葡糖转移酶2家族肽B4(UGT2B4)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-氧茴香硫 98%Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) /FITC 荧光素标记化组蛋白H2AX抗体IgG鸡巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-羟茴香硫 98%Anti-Histone H3/FITC 荧光素标记抗组蛋白抗体(AHA)IgG鸡原卟啉(EPP)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-硫乙酮 97%Anti-Histone H3-like protein/FITC 荧光素标记抗组蛋白H3样抗体(N端抗体)IgG鸡胎盘核糖核抑制剂(PRI)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-硫 98%Anti-Histone H3-like protein/FITC 荧光素标记抗组蛋白H3样抗体(C端抗体)IgG鸡生长激素2(GH2)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-并噻吩-2-羧 97%Anti-Histone H3-like protein/FITC 荧光素标记抗组蛋白H3样抗体(N端抗体)IgG鸡玻连蛋白(VTN)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-巯吡啶 98%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser10)/FITC 荧光素标记化组蛋白3抗体IgG鸡GATA结合蛋白4(GATA4)酶联免疫吸附测定试剂盒
B-Raf抑制剂(GDC-0879)α-1抗胰糜蛋白酶Anti-ADI1 Antibody黄芫花Huang Yuanhua
胰糜蛋白酶Anti-ADPGK Antibody乌贼墨Squid ink
促肾上腺皮质(18-39)(抗原)Anti-ADNP Antibody地蜈蚣Earwig
脑肠肽(一种新的生长释放肽)多肽抗原Anti-ADM Antibody膏桐Jatropha curcas
胃泌素/蛙皮素(多肽人源)Anti-ADRA1D Antibody透骨香Gaultheria yunnanensis.
外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原Anti-ADRA2C Antibody赤胫散Red?tibial?powder
牛胰岛素蛋白Anti-ADRA2B Antibody大血藤Sargentodoxa cuneata
蛋白酶激活受体-2激活肽Anti-AF4 Antibody八角枫Alangium
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:B-Raf,抑制剂,GDC-0879













