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BiP抑制剂(HA15)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:BiP抑制剂(HA15)
英文名称:HA15
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
HA15是一个小分子BiP的抑制剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1609402-14-3
纯度:99.82%
分子量:466.58
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
二硅油DC-200 粘度~10 mPa.s, neat(25 °C)Anti-GAI3/FITC 荧光素标记抑制型G蛋白α3抗体IgG鸡特异性β1糖蛋白(PSG1/SP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硅油DC-200 粘度~50 mPa.s, neat(25 °C)Anti-Galectin-3/FITC 荧光素标记半糖凝集素-3抗体IgG鸡肌球蛋白轻链1(MYL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硅油DC-200 粘度~30000 mPa.s, neat(25 °C)Anti-GAP-43 /FITC 荧光素标记神经生长相关蛋白-43(抗体)IgG鸡碳酐酶I(CA1)酶联免疫吸附测定试剂盒
1-BOC-氮杂环丁烷-3-羧 98%Anti-GAPDH /FITC 荧光素标记3-甘油脱氢酶抗体IgG鸡补体片段3c(C3c)酶联免疫吸附测定试剂盒
1-Boc-3-羟吖丁啶 97%Anti-GAPDH(human)/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢酶(人)抗体IgG鸡β素(bTC)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-氨-4,4,4-三氟乙酯 97%Anti-GAPDH(rat、mouse)/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢酶(大鼠、小鼠)抗体IgG鸡二淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)酶联免疫吸附测定试剂盒
三氟酮酯 97%Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢酶IgG鸡外质糖蛋白(MEPE)酶联免疫吸附测定试剂盒
1,1,1-三氟-2-丁酮 96%Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢酶抗体IgG鸡脑源性神经营养因子(BDNF) 酶联免疫吸附测定试剂盒
Cbz-L-苏氨苄酯 98%Anti-Gastrin/FITC 荧光素标记胃泌素/蛙皮素抗体IgG鸡质金属蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)酶联免疫吸附测定试剂盒
叔丁氧羰酰正亮氨二环己盐 ≥98.5%Anti-Gastrin/FITC 荧光素标记胃泌素/蛙皮素抗体IgG鸡弹性蛋白酶2B(ELA2B)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-溴苄-N-琥珀酰亚碳酯 99%Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC 荧光素标记蛙皮素受体3抗体IgG鸡肌-3-激酶催化亚σ肽(PIK3Cσ)酶联免疫吸附测定试剂盒
1,2-二(4-吡啶)乙烯 98%Anti-GATA-3/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白3抗体IgG鸡叉头框蛋白O2(FOXO2)酶联免疫吸附测定试剂盒
D-2,4-二氨丁 99%Anti-GATA-4/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白4抗体IgG鸡中脑星型胶质来源神经营养因子(MANF)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-(4-氟酰)丁 98%Anti-GATA-5/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白5抗体IgG鸡状旁腺激素样蛋白(PLP)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-羟硫酚 96%Anti-GATA-6/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白6抗体IgG鸡列腺素I合酶(PTGIS)酶联免疫吸附测定试剂盒
BiP抑制剂(HA15)Cy3标记的驴抗兔IgGAnti-ABCF1 Antibody安格洛苷C115909-22-3说明书
Cy5.5标记的驴抗兔IgGAnti-ABHD12B Antibody栀子苷24512-63-8品牌
Cy7标记的驴抗兔IgGAnti-ABCF2 Antibody利血平50-55-5说明书
PE标记的驴抗兔IgGAnti-ABHD11 Antibody苍术素55290-63-6规格
PE-Cy3标记的驴抗兔IgGAnti-ABHD14A Antibody5-O-甲基维斯阿米醇84272-85-5规格
PE-CY5标记的驴抗兔IgGAnti-ABHD2 Antibody獐牙菜苦苷17388-39-5说明书
APC标记的驴抗兔IgGAnti-ACACA Antibody酸枣仁皂苷B55466-05-2品牌
Alexa Fluor 350标记的驴抗兔IgGAnti-ABHD8 Antibody哈巴6926-08-5品牌
热门标签:BiP,抑制剂,HA15













