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Axl抑制剂(SGI-7079)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:Axl抑制剂(SGI⁻⁷079)
英文名称:SGI⁻⁷079
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
SGI⁻⁷079是一种Axl抑制剂,显著抑制SUM149和KPL-4细胞增殖,IC50分别为0.43和0.16μM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1239875-86-5
纯度:98.18%
分子量:455.53
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
双(2-二膦乙) 96%Anti-FASN/FITC 荧光素标记抗脂肪合成酶抗体IgG鸡解旋酶样转录因子(HLTF)酶联免疫吸附测定试剂盒
(1S,2S)-2-(二膦)环己 97%Anti-FasL/FITC 荧光素标记FasL蛋白抗体IgG鸡血管紧张肽酶A(ATA)酶联免疫吸附测定试剂盒
(1S,2S)-(-)-1, 2-二-1, 2-乙二 98%Anti-FAST kinase/FITC 荧光素标记抗Fas活化的丝/苏氨激酶抗体IgG鸡葡萄糖变位酶(PGM)酶联免疫吸附测定试剂盒
(1S,2S)-N-(对磺酰)-1,2-二乙二 98%Anti-FBN1 /FITC 荧光素标记原纤维蛋白1抗体IgG鸡延伸蛋白A(EloA)酶联免疫吸附测定试剂盒
(1S,2S)-(+)-N,N'-二环己烷-1,2-二 98%Anti-Fc GammaR II A/CD32a/FITC 荧光素标记免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体IgG鸡血小板相关抗体IgM(PA-IgM)酶联免疫吸附测定试剂盒
(1S,2S)-(-)-1,2-环己二D-盐 98%Anti-FDC-SP/FITC 荧光素标记抗B淋巴表面结合蛋白抗体IgG鸡列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2/COX-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
(S,S)-2,6-双(4-异-2-恶唑啉-2-)吡啶 99%Anti-Fe65 protein/FITC 荧光素标记Fe65 蛋白抗体IgG鸡趋化素样因子超家族成员5(CKLFSF5)酶联免疫吸附测定试剂盒
(S,S)-N-(对磺酰)-1,2-二乙烷二(对异)化钌(II) Anti-FGF1/FITC 荧光素标记性成纤维生长因子鸡白分化抗原CD109(CD109)酶联免疫吸附测定试剂盒
二乙酰[(S)-(-)-2,2'-双(二-P-酰)-1,1'联萘]钌 95%Anti-FGF3/Oncogene INT2 /FITC 荧光素标记纤维母生长因子3抗体IgG鸡软骨糖蛋白39(GP39)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,2′:6′,2′′-三吡啶 98%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC 荧光素标记纤维母生长因子4抗体IgG鸡血小板反应蛋白2(TSP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
97%Anti-FGF5/FITC 荧光素标记纤维母生长因子5抗体IgG鸡天青杀素1(AZU1)酶联免疫吸附测定试剂盒
三特丁膦 1.0 M in tolueneAnti-KGF/FGF⁻⁷/FITC 荧光素标记角质形成生长因子受体/纤维母生长因子⁻⁷抗体IgG鸡白介素3介导核因子(NFIL3)酶联免疫吸附测定试剂盒
三(二亚苄酮)二钯,加合物 98%Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC 荧光素标记成纤维生长因子-8/纤维母生长因子-8抗体IgG鸡胃蛋白酶原C(PGC)酶联免疫吸附测定试剂盒
三氟乙酰酮 98%Anti-FGF-13/FITC 荧光素标记抗纤维母生长因子-13抗体IgG鸡性别决定区Y框蛋白2(SOX2)酶联免疫吸附测定试剂盒
三(2-)膦 97%Anti-FGF-10/FITC 荧光素标记成纤维生长因子-10/纤维母生长因子-10抗体IgG鸡谷胱甘肽S-转移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)酶联免疫吸附测定试剂盒
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