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HDAC6抑制剂(ACY-738)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:HDAC6抑制剂(ACY⁻⁷38)
英文名称:ACY⁻⁷38
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
ACY⁻⁷38是一种有效的,选择性的HDAC6抑制剂,IC50值为1.7nM;同时可抑制HDAC1,HDAC2和HDAC3的活性,IC50值分别为94,128和218nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1375465-91-0
纯度:99.14%
分子量:270.29
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
马心肌红蛋白相对分子质量标准物质 马心肌红蛋白:16951Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠周期素D3豚鼠谷转氨酶(ALT)酶联免疫吸附测定试剂盒
纯度标准物质 99.7%Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠周期素D2豚鼠通用转录复合体(GTC)酶联免疫吸附测定试剂盒
无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:1.00μg/mL;AsE(Mouse estrogen) ELISA Kit 小鼠雌激素豚鼠肌球蛋白轻链1(MYL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;AsCyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit 小鼠周期素D1豚鼠癌蛋白诱导转录物3(OIT3)酶联免疫吸附测定试剂盒
无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;AsMBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit 小鼠髓脂碱性蛋白豚鼠趋化因子C-C-元配体1(CCL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
一砷溶液标准物质 0.335μmol/gTGF- Alpha(Mouse transforming growth factor Alpha) ELISA Kit 小鼠转化生长因子α豚鼠血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX3)酶联免疫吸附测定试剂盒
百草枯标准物质 99.9%AFP(Mouse Alpha-ferotein) ELISA Kit 小鼠种胎儿球蛋白/胎蛋白豚鼠胶原酶I(Collagenase I)酶联免疫吸附测定试剂盒
对酚标准溶液1.00mg/ml,体:PAP(Mouse Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 小鼠列腺性酶豚鼠速激肽受体3(TACR3)酶联免疫吸附测定试剂盒
萘标准溶液 51.7μg/mL,体:PSA(Mouse prostate specific antigen) ELISA Kit 小鼠列腺特异性抗原豚鼠粘蛋白20(MUC20)酶联免疫吸附测定试剂盒
呋喃妥因 98%(Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit 小鼠卵巢癌标志物CA125豚鼠列腺素E合酶2(PTGES2)酶联免疫吸附测定试剂盒
除草 分析标准品(Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit 小鼠癌标志物-CA153豚鼠肌腱蛋白C(TNC)酶联免疫吸附测定试剂盒
除草 分析标准品,99.9%(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃肠癌标志物CA199豚鼠间隙连接蛋白β1(GJβ1)酶联免疫吸附测定试剂盒
镍标准溶液 100(20℃)μg/mL,体:1%HNO3HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血红素氧合酶1豚鼠质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
硝根离子(NO5-)标准溶液1000μg/ml,溶剂:水PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit 小鼠脂酶A2豚鼠CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)酶联免疫吸附测定试剂盒
硝根离子(NO6-)标准溶液100μg/ml,溶剂:水TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit 小鼠组织因子途径抑制物豚鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)酶联免疫吸附测定试剂盒
HDAC6抑制剂(ACY⁻⁷38)Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgGAnti-SLC25A16 Antibodybufotaline471-95-4说明书
PE-Cy3标记的小鼠抗兔IgMAnti-SLC25A19 Antibodyafzelin482-39-3说明书
PE-CY5标记的小鼠抗兔IgMAnti-SLC2A1 AntibodyDL—同型半胱氨酸504-33-6价格
Cy5标记的兔抗大鼠IgGAnti-SLC26A4 Antibody巴西474-07⁻⁷品牌
Cy5.5标记的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A1 Antibody(PB0439)光翠雀碱26166-37-0品牌
PE标记的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A12 Antibody经5704-04-1规格
PE-Cy7标记的兔抗大鼠IgGAnti-SLC2A10 Antibody二甲氨基吡啶60-92-4品牌
FITC标记的兔抗小鼠IgGAnti-SLC2A2 Antibody(B0440)巴马汀3486-67⁻⁷品牌
热门标签:HDAC6,抑制剂,ACY-738













