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TGF-β1抑制剂(Disitertide)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:TGF-β1抑制剂(Disitertide)
英文名称:Disitertide
产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
发货周期:1~3天
Disitertide(P144)是TGF-β1的抑制剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:272105-42⁻⁷
别名:P144;P144 Peptide
纯度:98.12%
分子量:1580.82
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
(-)-假木贼碱 94%SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液)兔蛋白激酶C-γ(PKCγ)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-氨-1-丁 98%F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit 人活化凝血因子Ⅻ兔成骨生长肽(OGP)酶联免疫吸附测定试剂盒
烯()二硅烷 97%Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit 人游离蛋白S兔趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联免疫吸附测定试剂盒
DL-精氨 98%APT(Human Abnormal prothrombin) ELISA Kit 人异常凝血酶原兔谷胱甘肽S转移酶θ2(GSTθ2/GSTt2)酶联免疫吸附测定试剂盒
化乙酰胆碱 98%CIC(Human circulating immune complex) ELISA Kit 人循环免疫复合物兔内皮抑制素(ES)酶联免疫吸附测定试剂盒
1-乙酰哌 99%PA-IgM(Human Plaet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相关抗体IgM兔表皮脂肪结合蛋白5(FABP5)酶联免疫吸附测定试剂盒
顺式-乌头 90%FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit 人血纤肽/纤维蛋白肽A兔腺苷环化酶1(ADCY1)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-氨 97%Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit 人纤溶酶原兔接触蛋白相关蛋白1(CNTNAP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
醋锑 97%CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人性T淋巴相关抗原4兔S100钙结合蛋白A7 (S100A7)酶联免疫吸附测定试剂盒
9-氨吖啶盐盐 99%Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白轻链lambda兔轴突生长诱向因子4(Ntn4)酶联免疫吸附测定试剂盒
(R)-2-氨己烷 ChiPros 99+%, ee 99+%pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要组织相容性复合体复合物兔脂酶C(PLC)酶联免疫吸附测定试剂盒
1-金刚烷乙 98%CLA(Human cutaneous lymphocyte-associated antigen) ELISA Kit 人皮肤淋巴相关抗原兔肌球蛋白重链9(MYH9)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-氨马尿 98%T-TM(Human thrombinthrombomodulin compound) ELISA Kit 人凝血酶血栓调节蛋白复合物兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)酶联免疫吸附测定试剂盒
苊醌 98%Hc(Human Hemolytic complement) ELISA Kit 人溶血补体兔多巴受体D3(D3R/DRD3)酶联免疫吸附测定试剂盒
酮缩氨脲 97%TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T受体兔肿瘤坏死因子受体超家族成员1A(TNFRSF1A)酶联免疫吸附测定试剂盒
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热门标签:TGF-β1,抑制剂,Disitertide













