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FAK抑制剂(PF-573228)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:FAK抑制剂(PF-573228)
英文名称:PF-573228
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
PF-573228是有效的和选择性的FAK抑制剂,对FAK纯化重组催化片段的IC50值为4nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:869288-64-2
纯度:98.72%
分子量:491.49
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
聚乙烯缩丁 M.W.40,000⁻⁷0,000P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) ELISA kit 人P选择素兔泛素特异性肽酶8 (USP8)酶联免疫吸附测定试剂盒
聚乙烯缩丁 M.W.90,000-120,000PDGF-AB(Human Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 人血血小板衍生生长因子AB兔异体移植炎性因子1(AIF1)酶联免疫吸附测定试剂盒
聚乙烯缩丁 M.W.170,000-250,000PDGFsR- Alpha(Human Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 人血血小板衍生生长因子可溶性受体α兔谷胱甘肽还原酶(GR)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-精氨盐盐 98%HNT-4(uman Neurotrophin 4) ELISA KIT 人神经营养因子4兔血清素转运体(SERT)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-胱氨 99%NT-3 ELISA Kit 人神经营养因子3兔神经营养性酪氨激酶2型受体(NTRK2)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-胱氨 分析标准品,≥99.5%NGF(Human Nerve growth factor) ELISA kit 人的神经生长因子兔III型胶原α1(COL3α1)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-胱氨 超纯,99.5%NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神经生长因子-β兔脂球表皮生长因子8 (MFG-E8)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-半胱氨盐盐,一水 99%MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬炎性蛋白3β兔补体因子4 (C4)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-组氨 99%MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬炎性蛋白3α兔血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)酶联免疫吸附测定试剂盒
癸二二辛酯 Standard for GC, ≥98.5% (GC)MIP-1 Beta/CCL4(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Beta) ELISA kit 人巨噬炎性蛋白1β兔血浆五聚蛋白3 (PTX 3/TSG-14)酶联免疫吸附测定试剂盒
癸二二辛酯 AR,97.0%MIP-1 Alpha/CCL3(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Alpha) ELISA kit 人巨噬炎性蛋白1α兔6酮列腺素(6-K-PG)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻二丁苄酯 98%MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬来源的趋化因子兔状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻二二丁酯 >97.0%(GC)M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬集落激因子兔降钙素(CT)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻二二异癸酯 99%(支链异构体类的混合物总和)MIC-1 human ELISA kit 人巨噬抑制因子-1 ELISA 试剂盒兔纤调蛋白(FMOD)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻二二异癸酯 分析标准品MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人单核趋化蛋白3兔胰蛋白酶原激活肽(TAP)酶联免疫吸附测定试剂盒
FAK抑制剂(PF-573228)突触囊泡融合蛋白Unc18-3抗体Anti-LBP AntibodyHuH⁻⁷人肝癌品牌
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