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c-Met/ALK抑制剂
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:c-Met/ALK抑制剂
英文名称:Crizotinib hydrochloride
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
发货周期:1~3天
Crizotinib hydrochloride是一种有效的c-Met/ALK抑制剂,细胞实验中IC50分别为11nM,24nM
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1415560-69-8
别名:PF-02341066 hydrochloride
纯度:99.86%
分子量:486.8
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
化钙 CP,98%Gentamicin/FITC 荧光素标记庆大霉素猴肠脂肪结合蛋白(IFABP)酶联免疫吸附测定试剂盒
钙 SUTetracycline/OVA 四环素偶联鸡卵白蛋白猴泛素结合酶E2C(UBE2C)酶联免疫吸附测定试剂盒
钙 98%Oxytetracycline/BSA 土霉素偶联牛血清白蛋白猴趋化因子CXC配体16 (CXCL16)酶联免疫吸附测定试剂盒
氢 AR,≥47.0%Oxytetracycline/OVA 土霉素偶联鸡卵白蛋白猴绒毛膜促性腺激素β(CGβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
氢 55.0 - 58.0 %streptomycin/OVA 链霉素偶联血蓝蛋白猴巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)酶联免疫吸附测定试剂盒
AR,99.5%Penicillin G/BSA 青霉素G偶联牛血清白蛋白猴碱性酶(ALP)酶联免疫吸附测定试剂盒
化锂,三水 99.9%Penicillin G/OVA 青霉素G偶联鸡卵白蛋白猴叉头框蛋白O1(FOXO1)酶联免疫吸附测定试剂盒
高 ACS,99.8-100.3%streptomycin/BSA 链霉素偶联牛血清白蛋白猴载脂蛋白C2(ApoC2)酶联免疫吸附测定试剂盒
高钠 AR,99.5%streptomycin/OVA 链霉素偶联鸡卵白蛋白猴状旁腺激素受体2(PTHR2)酶联免疫吸附测定试剂盒
高钠 CP,99.0%Metronidazole/OVA 硝唑偶联鸡卵白蛋白猴甘油变位酶2(PGAM2)酶联免疫吸附测定试剂盒
钠 99%Metronidazole/BSA 硝唑偶联牛血清白蛋白猴表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶联免疫吸附测定试剂盒
9-芴酮 99%Morphine/KLH 与血蓝蛋白偶联物猴巨噬集落激因子(MCSF)酶联免疫吸附测定试剂盒
氧气 99.2%Metronidazole/KLH 硝唑偶联牛血蓝蛋白猴血小板相关免疫球蛋白(PAIg)酶联免疫吸附测定试剂盒
高纯氩气 99.999%Morphine/BSA 与牛血清蛋白偶联物猴多功能蛋白聚糖(VS)酶联免疫吸附测定试剂盒
氢气氩气混合气体 H10%+Ar90%TRF(transferrin) 转铁蛋白猴 短蛋白聚糖(BCAN)酶联免疫吸附测定试剂盒
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注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:c-Met/ALK,抑制剂













