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IDO1抑制剂(IDO5L)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:IDO1抑制剂(IDO5L)
英文名称:IDO5L
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
发货周期:1~3天
IDO-IN-2是一种有效的IDO1抑制剂,作用于Hela细胞,IC50为19nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:914471-09-3
纯度:99.29%
分子量:271.64
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
乙二四乙二钠标准溶液 0.05000mol/L (0.05MCD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1) 神经粘附分子1(抗原)猴血小板亲和蛋白2(PKP2)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙二四乙二钠标准溶液 0.02000mol/L (0.02M)CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic Anti-gen-related cell adhesion molecule 8) 癌胚抗原相关粘附分子8(抗原)猴复制蛋白A(RPA⁻⁷0)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙二四乙二钠标准溶液 0.01000mol/L (0.01M)CD68 CD68抗原猴软骨糖蛋白39(GP39)酶联免疫吸附测定试剂盒
金标准溶液 1000μg/mlCD68 CD68(多肽抗原)猴神经激肽B(NKB)酶联免疫吸附测定试剂盒
金标准溶液 100μg/mlCD117/c-kit/SCFR 干生长因子受体/表面分化抗原(抗原)猴神经胶质成熟因子β(GMFβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
盐标准溶液 1.000mol/L(1N)CD133 Anti-gen 造血干抗原(多肽抗原)猴神经肽Y受体Y2(NPYR2)酶联免疫吸附测定试剂盒
盐标准溶液 0.5000mol/L(0.5N)CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)猴多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
盐标准溶液 0.2000mol/L(0.2N)CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原猴胞浆蛋白1(STMN1)酶联免疫吸附测定试剂盒
盐标准溶液 0.1000mol/L(0.1N)CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴衰减蛋白(抗原)猴钙腔蛋白(CALU)酶联免疫吸附测定试剂盒
盐溶液 6mol/L(6N)CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依赖激酶2(抗原)猴活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)酶联免疫吸附测定试剂盒
铁标准溶液 1000μ/mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依赖性激酶4(抗原)猴5核苷酶(5-NT)酶联免疫吸附测定试剂盒
铁标准溶液 100μ/mlCEA (Carcinoembryonic Anti-gen ) 人癌胚抗原(抗原)猴载脂蛋白C4(ApoC4)酶联免疫吸附测定试剂盒
标准溶液 0.05000mol/L (0.1N)ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 蕈碱型乙酰胆碱受体M2(抗原)猴血小板相关抗体IgM(PA-IgM)酶联免疫吸附测定试剂盒
铅标准溶液 1000mg/L,溶剂:1%硝Connexin-43(Cx43) 间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)猴弹性蛋白酶3B(ELA3B)酶联免疫吸附测定试剂盒
铅标准溶液 100μg/mlConnexin-45(CX45) 间隙连接蛋白45(抗原)猴抗壁抗体(TA)酶联免疫吸附测定试剂盒
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热门标签:IDO1,抑制剂,IDO5L













