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CDK/TRK抑制剂(PHA-848125)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:CDK/TRK抑制剂(PHA-848125)
英文名称:PHA-848125
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
PHA-848125是一种有效的CDK和Tropomyosin receptor kinase(TRK)双重抑制剂,对cyclin A/CDK2,cyclin H/CDK7,cyclin D1/CDK4,cyclin E/CDK2,cyclin B/CDK1和TRKA的IC50值分别为45,150,160,363,398和53nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:802539-81⁻⁷
别名:Milciclib
纯度:98.61%
分子量:460.57
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
(S)-(+)-2-氨-1-丁 98%NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 一氧化氮合成酶-3(抗原)猴维生素D结合蛋白(DBP)酶联免疫吸附测定试剂盒
(R)-(-)-2-氨-1-丁 98%NPY ( Neuropeptide Y) 神经肽 Y(抗原)猴失调症蛋白质2(ATXN2)酶联免疫吸附测定试剂盒
2--4'-联 98%NR2B (Glutamate receptor) 谷氨受体(抗原)猴趋化因子C-C-元配体16(CCL16)酶联免疫吸附测定试剂盒
0.98NT-3 神经生长因子-3(抗原)猴T受体(TCR)酶联免疫吸附测定试剂盒
0.99NT-4,NT-5 神经生长因子4/5(抗原)猴睾酮受体(TR)酶联免疫吸附测定试剂盒
利福平 97%NTN (Neurturin) 神经生长因子(抗原)猴黑素瘤黏附分子(MCAM)酶联免疫吸附测定试剂盒
环氧烷 99%Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原猴补体因子3(C3)酶联免疫吸附测定试剂盒
环氧烷 CPphospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原猴促有丝分裂因子(MF/MPF)酶联免疫吸附测定试剂盒
环氧烷 99.5%BCHE(butyrylcholinesterase)NT 丁酰胆碱脂酶抗原(N端)猴β葡糖苷酶(β-Glu)酶联免疫吸附测定试剂盒
环氧烷 分析标准品,≥99.7% (GC)BCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰胆碱脂酶抗原(C端)猴接触蛋白相关蛋白样蛋白2(CNTNAP2)酶联免疫吸附测定试剂盒
四羟硫 75%水溶液Nurr1 核受体相关因子-1(抗原)猴同线蛋白2(ST2)酶联免疫吸附测定试剂盒
钙 AR, ≥99.0% (RT)CD73 (5´-nucleotidase cytosolic II ) 胞浆-5´-核苷酶-Ⅱ 抗原猴过氧化物酶体增殖物激活受体γ( PPAR-γ)酶联免疫吸附测定试剂盒
AR,50 % in H2O BECN1(Beclin1) 一种抑癌因(多肽)猴尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(PLAUR/uPAR)酶联免疫吸附测定试剂盒
钠 AR,99.0%OGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生长肽 (骨生长激素肽)(蛋白多肽)猴粘蛋白21(MUC21)酶联免疫吸附测定试剂盒
钠 CP,98.0%OPN 骨桥蛋白(多肽抗原)猴胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)酶联免疫吸附测定试剂盒
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热门标签:CDK/TRK,抑制剂,PHA-848125













