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MLCK和TRPC6通道抑制剂
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详细内容
中文名称:MLCK和TRPC6通道抑制剂
英文名称:ML⁻⁷ hydrochloride
产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg
发货周期:1~3天
ML⁻⁷hydrochloride是一种萘磺酰胺衍生物,有效抑制MLCK(IC50=300nM)和TRPC6通道(IC50>10μM)。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:110448-33-4
纯度:98.18%
分子量:452.74
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
姜黄素 98%A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀粉样肽29-40(野生型)猴分泌型免疫球蛋白A(sIgA)酶联免疫吸附测定试剂盒
姜黄素 分析标准品A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉样肽29-42(野生型)猴G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)酶联免疫吸附测定试剂盒
班蝥素 98%Beta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42)(多肽蛋白)猴小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)酶联免疫吸附测定试剂盒
班蝥素 分析标准品,≥98%Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉样肽25-35(多肽)猴内皮素转化酶1(ECE1)酶联免疫吸附测定试剂盒
辅酶Q10 98%Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉样肽 1-42 (C端多肽)猴纤维蛋白原(FBG)酶联免疫吸附测定试剂盒
喜树碱 97%Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽)猴信号素4C (SEMA4C)酶联免疫吸附测定试剂盒
叶绿素b 95%APP695⁻⁷70/APP17肽 (Amyloid protein precursor) 淀粉样肽体蛋白(17肽抗原)猴血管紧张素II受体1(ANG II R1)酶联免疫吸附测定试剂盒
隐绿原 分析标准品Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神经保护肽猴肌腱蛋白X(TNX)酶联免疫吸附测定试剂盒
洋蓟素 分析标准品,≥98%Amylin(1-37)Diabetes Associated Peptide (DAP), amide, human 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽)猴酮激酶M2型同工酶(PKM2)酶联免疫吸附测定试剂盒
大黄酚 分析标准品,≥98%CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨环肽猴白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫吸附测定试剂盒
大黄酚 97%CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨环肽猴促状腺素释放激素(TRH)酶联免疫吸附测定试剂盒
去斑蝥素 分析标准品,≥98%GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide 胰高血糖素样肽-1(多肽)猴肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫吸附测定试剂盒
0.95ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov 肾上腺髓质素蛋白(N端20肽)猴接触蛋白4(CNTN4)酶联免疫吸附测定试剂盒
黄豆苷 分析标准品,≥96%GRGDS peptide 粘附多肽GRGDS猴转铁蛋白(TRF)酶联免疫吸附测定试剂盒
黄豆苷 95%PACAP(1-38 Peptide) 腺苷环化酶激活肽 1-38(全蛋白)猴胎盘钙黏蛋白(P-Cadherin)酶联免疫吸附测定试剂盒
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热门标签:MLCK和TRPC6通道,抑制剂













