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胰岛素受体抑制剂(BMS-754807)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:胰岛素受体抑制剂(BMS⁻⁷54807)
英文名称:BMS⁻⁷54807
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
BMS⁻⁷54807是有效、可逆的胰岛素样生长因子1受体/胰岛素受体抑制剂,其IC50值分别为1.8和1.7nM,Ki值均小于2nM;同时也抑制Met,RON,TrkA,TrkB,AurA和AurB的活性,其IC50值分别为6,44,7,4,9和25nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1001350-96-4
纯度:99.79%
分子量:461.49
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
壬-β-D-吡喃葡糖苷 98%Anti-STAT1/FITC 荧光素标记信号转导与转录激活因子1抗体IgG猪β-微管蛋白(TUBβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
n-辛-β-D-吡喃葡萄糖苷 97%Anti-phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 荧光素标记化信号转导与转录激活因子1抗体IgG猪脂氧素A4(LXA4)酶联免疫吸附测定试剂盒
n-辛-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%,用于蛋白分析Anti-STAT2/FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子2(STAT2)抗体IgG猪调节正常T表达和分泌因子(RANTES)酶联免疫吸附测定试剂盒
辛-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 99%Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子2抗体IgG猪胎盘蛋白14 (PP14)酶联免疫吸附测定试剂盒
邻二酚紫 INDAnti-STAT3 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子3抗体IgG猪白介素1受体关联激酶3 (IRAK3)酶联免疫吸附测定试剂盒
姥鲛烷 98%Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子3抗体IgG猪纤溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)酶联免疫吸附测定试剂盒
1-芘丁 99%Anti-STAT4 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子4抗体IgG猪Persephin蛋白(PSPN)酶联免疫吸附测定试剂盒
D-潘糖 98%Anti-Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC 荧光素标记化信号转导和转录激活因子4抗体IgG猪胃蛋白酶原C(PGC)酶联免疫吸附测定试剂盒
5-酰核糖-1-焦钠盐 80%Anti-STAT5/FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗体IgG猪趋化因子C-C-元配体14(CCL14)酶联免疫吸附测定试剂盒
β-五没食子酰葡萄糖 分析标准品Anti-STAT6 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子6抗体IgG猪精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶联免疫吸附测定试剂盒
D-氨葡萄糖-6-硫盐 99%Anti-STEAP1/FITC 荧光素标记列腺跨膜上皮抗原1抗体IgG猪凋亡蛋白酶激活因子1(APAF-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
异槲皮苷 98%Anti-StAR/StARD1/FITC 荧光素标记促黄体激素诱导蛋白抗体IgG猪成熟促进因子(MPF)酶联免疫吸附测定试剂盒
异槲皮苷 分析标准品,98%Anti-STK/CK I Alpha/FITC 荧光素标记属丝/苏氨蛋白质激酶抗体IgG猪血管内皮抑素抗体(ES-Ab)酶联免疫吸附测定试剂盒
D-核糖 CP,98%Anti-STK/CK II Alpha/FITC 荧光素标记丝/苏氨蛋白质激酶抗体IgG猪抗白蛋白抗体(AAA)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-核糖 98%Anti-STK/CK II Alpha/FITC 荧光素标记属丝/苏氨蛋白质激酶抗体IgG猪纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
胰岛素受体抑制剂(BMS⁻⁷54807)RAN结合蛋白2/核孔蛋白抗体Anti-DARS2 AntibodySphingomonastrueperi说明书
环指蛋白11抗体Anti-DAZAP1 AntibodyPseudozymaantarctica说明书
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