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HER2抑制剂(Irbinitinib)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:HER2抑制剂(Irbinitinib)
英文名称:Irbinitinib
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
Irbinitinib(ARRY-380;ONT-380)是高效的选择性的HER2抑制剂,IC50值为8nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:937263-43-9
别名:ARRY-380;ONT-380
纯度:99.57%
分子量:480.52
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
L-茶氨 98%Anti-ICAM-1(CD54)/FITC 荧光素标记间粘附分子-1抗体IgG猪色素P450家族成员7A1(CYP7A1)酶联免疫吸附测定试剂盒
L-谷氨酰 99%Anti-CD54/ICAM-1/Biotin 生物素标记间粘附分子-1抗体IgG猪CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 轻质AR,99.5%Anti-ICAM-3/CD50/FITC 荧光素标记间粘附分子-3抗体IgG猪过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 99.99% metals basis,粒径:5μmAnti-Icos/CD278/FITC 荧光素标记诱导协同激分子CD278抗体IgG猪腺苷环化酶3(ADCY3)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 GRAnti-ICOS-L/B7-H2/CD275/FITC 荧光素标记诱导协同激分子配体CD275抗体IgG猪列腺素D2合成酶(PGD2S)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 99.99% metals basis,粒径:10μmAnti-IDE/FITC 荧光素标记胰岛素降解酶抗体IgG猪质金属蛋白酶9(MMP-9)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 SPAnti-ID1/Inhibitor of DNA binding 1 /FITC 荧光素标记DNA结合抑制因子1抗体IgG猪抗钙调素特异抗体(CAM-Ab)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 99.99% metals basis,粒径:2μmAnti-IDE/FITC 荧光素标记胰岛素降解酶抗体IgG猪间羟肾上腺素(MN)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅标准溶液 1000μg/mlAnti-IFABP/FITC 荧光素标记小肠型脂肪结合蛋白抗体IgG猪轻肽铁蛋白(FTL)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅标准溶液 100mg/L,体:0.05%Na2CO3Anti-IFABP/FITC 荧光素标记小肠型脂肪结合蛋白抗体IgG猪心肌钙黏蛋白(H-Cadherin)酶联免疫吸附测定试剂盒
亲水性气相纳米二氧化硅Hydr 99.8%,比表面积(BET):200m2/g;粒Anti-IFI16/p16 /FITC 荧光素标记γ干扰素诱导蛋白16抗体IgG猪抗氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 1-3mm 颗粒,99.999%Anti-IFITM1/FITC 荧光素标记干扰素诱导跨膜蛋白1抗体IgG猪长效状腺激素(LATS)酶联免疫吸附测定试剂盒
纳米二氧化硅 99.5%,50±5nmAnti-human IFN- Alpha /FITC 荧光素标记干扰素-α抗体(抗人)IgG猪肝脏/红酮激酶(PK)酶联免疫吸附测定试剂盒
二氧化硅 99.999%,直径2mm,高度10mm,圆柱体状Anti-IFN- Beta/FITC 荧光素标记干扰素-β抗体IgG猪八聚体转录因子2A(OTF2A)酶联免疫吸附测定试剂盒
气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):200m2/g;化物:0.01Anti-IFN- Beta/FITC 荧光素标记抗人干扰素-β抗IgG猪过氧化物酶体膜蛋白3(PMP3)酶联免疫吸附测定试剂盒
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