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蛋白酶体抑制剂(MLN2238)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:蛋白酶体抑制剂(MLN2238)
英文名称:MLN2238
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
发货周期:1~3天
MLN2238是一种有效的选择性的可逆蛋白酶体(proteasome)抑制剂,抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶样蛋白水解(β5)位点,IC50为3.4nM,Ki为0.93nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1072833⁻⁷7-2
别名:Ixazomib
纯度:99.07%
分子量:361.03
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
异丁酮 AR,99.0%Anti-E.coli O139/Gold 胶体金离子标记抗志贺素O139抗体IgG大鼠孕激素/孕酮(Pg)酶联免疫吸附测定试剂盒
异丁酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-E.coli O157/Gold 胶体金离子标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG大鼠孕酮受体(PGR)酶联免疫吸附测定试剂盒
新戊二 99%Anti-E.coli O157/Biotin 生物素标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG大鼠卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)酶联免疫吸附测定试剂盒
烯十八烷酯 96%Anti-Dysferlin/FITC 荧光素标记Dysferlin蛋白抗体IgG大鼠阻抑素(PHB)酶联免疫吸附测定试剂盒
三羟烷 98%Anti-EPEC/E.coli /Biotin 生物素化兔抗肠致病性抗体IgG大鼠胰岛素原(PI)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,5-二 97%Anti-E.coli/Biotin 生物素化兔抗普通大肠埃希菌菌体蛋白抗体IgG大鼠动力蛋白2(PK2)酶联免疫吸附测定试剂盒
3,4-二氢-2H-吡喃 98%Anti-E2F1/FITC 荧光素标记转录因子E2F-1抗体IgG大鼠动力蛋白受体1(PKR1)酶联免疫吸附测定试剂盒
2,3-二 99%Anti-E2F2/FITC 荧光素标记转录因子E2F-2抗体IgG大鼠增殖核抗原(PCNA)酶联免疫吸附测定试剂盒
四氢吡喃 99%Anti-E2F3/FITC 荧光素标记转录因子E2F-3抗体IgG大鼠颗粒酶K(GZMK)酶联免疫吸附测定试剂盒
芦荟宁 分析标准品,≥99%Anti-E2F4/FITC 荧光素标记转录因子E2F-4抗体IgG大鼠脯氨酰羧肽酶(PRCP)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙酯 AR,99% Anti-E2F5/FITC 荧光素标记转录因子E2F-5抗体IgG大鼠大脑列腺素合成酶(PGD2S)酶联免疫吸附测定试剂盒
芦荟宁 分析标准品,≥99%Anti-E2F6/FITC 荧光素标记抗转录因子E2F-6抗体IgG大鼠列腺素E受体2(EP2)酶联免疫吸附测定试剂盒
脱水羊藿素 分析标准品,≥99%(HPLC)Anti-E2 tag/FITC 荧光素标记E2 tag标签抗体IgG大鼠列腺素合成酶2(PTGES2)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙龙脑酯 分析标准品Anti-E2 tag/HRP 辣根过氧化物酶标记E2 tag标签抗体IgG大鼠微粒体列腺素E合酶(PTGES)酶联免疫吸附测定试剂盒
分析标准品(剧品)Anti-E7 protein/FITC 荧光素标记人瘤病16型E7抗体IgG大鼠神经调节蛋白1(NRG-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
蛋白酶体抑制剂(MLN2238)PEST含核蛋白抗体Anti-BCMA/Tnfrsf17 Antibody小鼠β葡萄糖醛酸苷酶elisa检测试剂盒品牌
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神经胞浆蛋白9.5抗体(蛋白基因产物9.5)Anti-BDNF Antibody(原货号PB0013)小鼠凝溶胶蛋白elisa检测试剂盒品牌
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