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BTK抑制剂(GDC-0853)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:BTK抑制剂(GDC-0853)
英文名称:GDC-0853
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
GDC-0853是一个强的和BTK抑制剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1434048-34-6
纯度:99.50%
分子量:664.8
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
蜕皮激素 分析标准品,≥95% (HPLC)Anti-AE3/FITC 荧光素标记阴离子交换蛋白3抗体IgG小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)酶联免疫吸附测定试剂盒
蜕皮激素 ≥93% (HPLC), 粉末Anti-AEV/FITC 荧光素标记禽脑脊髓炎病抗体IgG小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)酶联免疫吸附测定试剂盒
蜕皮激素 ≥95% (HPLC), 粉末Anti-AEBP1/FITC 荧光素标记脂肪增强结合蛋白1抗体IgG小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)酶联免疫吸附测定试剂盒
芍药苷 分析标准品,≥98%Anti-AF6/Afadin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG小鼠肿瘤蛋白53(TP53)酶联免疫吸附测定试剂盒
芍药苷 ≥98% (HPLC)Anti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫吸附测定试剂盒
仲丁 standard for GC, ≥99.8% (GC)Anti-AGER/RAGE /FITC 荧光素标记晚期糖化终末产物特异性受体抗体IgG小鼠酪氨酶(TRY)酶联免疫吸附测定试剂盒
仲丁 99.5%,无水Anti-AGEs/FITC 荧光素标记晚期糖化终末产物抗体IgG小鼠泛素蛋白(Ub)酶联免疫吸附测定试剂盒
仲丁 99%Anti-AGER/RAGE/Cy3 荧光素Cy3标记晚期糖化终末产物特异性受体抗体IgG小鼠高敏状腺素(u-T4)酶联免疫吸附测定试剂盒
仲丁 CP,99%Anti-Aggrecan/FITC 荧光素标记软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗体IgG小鼠高敏状腺原氨(u-T3)酶联免疫吸附测定试剂盒
仲丁 分析标准品,≥99.9% (GC)Anti-Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC 荧光素标记软骨蛋白聚糖抗体IgG小鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子(PLAU/uPA)酶联免疫吸附测定试剂盒
异 AR, ≥99.5% Anti-Agrin/FITC 荧光素标记聚集蛋白抗体IgG小鼠肌酐(Cr)酶联免疫吸附测定试剂盒
叔丁 分析标准品,>99.8%(GC)Anti-Agtr1/AT1a/FITC 荧光素标记血管组织血管紧张素Ⅱ1型受体抗体IgG小鼠血管内皮生长因子B(VEGF-B)酶联免疫吸附测定试剂盒
叔丁 HPLC,>99.5%(GC)Anti-AGER/Gold 金离子标记的晚期糖化终末产物特异性受体抗体小鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)酶联免疫吸附测定试剂盒
叔丁 GR,≥99.5% (GC)Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgG小鼠血管内皮生长因子D(VEGF-D)酶联免疫吸附测定试剂盒
叔丁 ARAnti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgG小鼠血管内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)酶联免疫吸附测定试剂盒
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