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JNK抑制剂(JNK-IN-8)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:JNK抑制剂(JNK-IN-8)
英文名称:JNK-IN-8
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
JNK-IN-8是一种有效的JNK抑制剂,抑制JNK1,JNK2和JNK3,IC50分别为4.7nM,18.7nM和1nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1410880-22-6
纯度:99.83%
分子式:C??H??N?O?
分子量:507.59
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
化镍 CP,98.0% Anti-PAX5 配对盒因5抗体小鼠凋亡蛋白酶激活因子(APAF1)酶联免疫吸附测定试剂盒
化镍 anhydrous, 99.99% metals basisAnti-PAX7 配对盒因7抗体小鼠水通道蛋白0(AQP-0)酶联免疫吸附测定试剂盒
肼 AR,98.0%Anti-PAX8 配对盒因8抗体小鼠二淋巴组织趋化因子(SLC)酶联免疫吸附测定试剂盒
苦酮 ARAnti-PAX9 配对盒因9抗体小鼠水通道蛋白1(AQP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
CP,99.0%(剧品)Anti-PBK/TOPK PDZ连接激酶/T-LAK源蛋白激酶抗体小鼠生长调节致癌因γ(GROγ)酶联免疫吸附测定试剂盒
GR,99.8%Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) 化PDZ连接激酶/T-LAK源蛋白激酶抗体小鼠水通道蛋白2(AQP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
99.995%Anti-Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体小鼠晚期糖化终末产物受体(AGER)酶联免疫吸附测定试剂盒
玫瑰红 IndicatorAnti-Phospho-Paxillin (Tyr118) 化桩蛋白Paxillin抗体小鼠水通道蛋白3(AQP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒
过氧化钠 95%Anti-P-cadherin P-钙粘附分子抗体小鼠水通道蛋白4(AQP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒
高钠 ACS, 99.8-100.3% Anti-R-cadherin R-钙粘附分子抗体小鼠精氨酶(Arg)酶联免疫吸附测定试剂盒
亚硝钴钠 AR,Co 13.5~14.5%Anti-LI-cadherin 肝肠钙粘连蛋白抗体小鼠精氨加压素受体1A(AVPR1A)酶联免疫吸附测定试剂盒
偏铝钠 ARAnti-PCNA 增殖核抗原抗体小鼠芳香烃受体(AhR)酶联免疫吸附测定试剂盒
烧碱石棉 CP,20-30目Anti-PCNA 增殖核抗原抗体小鼠芳香烃受体相互作用蛋白(AIP)酶联免疫吸附测定试剂盒
氢钠 AR(剧品)ANti-PDCD4 凋亡相关蛋白4抗体小鼠芳香烃受体核转位蛋白2(ARNT2)酶联免疫吸附测定试剂盒
亚硝钴钠 99.995% metals basisAnti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗体小鼠无唾液糖蛋白受体(ASGR1)酶联免疫吸附测定试剂盒
JNK抑制剂(JNK-IN-8)磷酸化核因子抗体Human ORM1(Alpha-1-acid glycoprotein 1) ELISA Kit猴抗肝膜抗体elisa检测试剂盒品牌
磷酸化核因子抗体Human NOS2/iNOS(Nitric oxide synthase, inducible) ELISA Kit内皮素1elisa检测试剂盒说明书
磷酸化核因子抗体Human TNNI1(Troponin I, slow skeletal muscle) ELISA Kit兔子S100B蛋白elisa检测试剂盒品牌
神经上皮转化基因1抗体Human IL7R(Interleukin⁻⁷ receptor) ELISA Kit兔子白介素4elisa检测试剂盒多少钱
粘附分子3抗体(脊髓灰质炎病受体相关蛋白3)Human LGALS1(Galectin-1) ELISA Kit绵羊白介素6elisa检测试剂盒品牌
螺旋环螺旋蛋白2抗体Human FABP1(Fatty acid-binding protein, liver) ELISA Kit鸭白介素6elisa检测试剂盒说明书
胚胎发育相关蛋白Nodal抗体Human MAP2K1(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1) ELISA Kit犬β内啡肽elisa检测试剂盒说明书
增殖相关蛋白NANOS1抗体Human IL36G(Interleukin-36 gamma) ELISA Kit犬间粘附分子1elisa检测试剂盒说明书
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